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黄芩素(Baicalein),又称5,6,7-三羟黄酮,是从唇形科(Laibiatea)草本植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)干燥的根中提取的一类黄酮化合物,是黄芩最有效的活性成分之一,具有广泛药理活性。黄芩素的毒性很低,近年来国内外研究证明,黄芩素具有潜在的抗癌抗肿瘤活性,能够诱导肿瘤细胞凋亡,抗新生血管生成以及诱导肿瘤细胞分化。黄芩素能抑制胰腺癌细胞的生长,促进胰腺癌细胞凋亡,但其对胰腺癌细胞的作用机制尚未明确。本研究首先通过CCK-8实验证明随着黄芩素浓度和处理时间增加癌细胞的生存能力逐渐下降;为探究黄芩素抑制细胞生长机制,通过Ki-67和流式细胞周期检测实验证明黄芩素能显著抑制细胞增殖并使细胞周期停滞于G0/G1期。AnnexinV FITC-PI流式检测结果表明药物处理后凋亡早期和晚期的细胞数量增多,凋亡家族蛋白表达水平也上升;划痕试验和Transwell侵袭实验证明黄芩素不仅能够以剂量和时间依赖方式诱导两种胰腺癌细胞系BxPC-3和PANC-1的凋亡,对胰腺癌细胞的运动能力有明显的减弱。而同样浓度黄芩素对正常的人肝细胞HL-7702和胚胎肾细胞293T有很低的毒性。通过筛选发现作为多种信号通路的上游分子起作用的骨架蛋白NEDD9可能作为黄芩素一个潜在的靶基因。为证明NEDD9在黄芩素治疗胰腺癌中的作用,通过转染敲低内源性NEDD9的表达,胰腺癌细胞的生长和运动能力受到抑制,与添加黄芩素的结果相符。此外黄芩素对Akt通路T-308磷酸化的抑制主要是通过抑制NEDD9下游PDK1表达实现的,PDK1作为T-308通路的上游因子起到了重要的调控作用。在添加黄芩素的胰腺癌细胞系BxPC-3和PANC-1中过表达NEDD9能够部分恢复胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力,但是NEDD9过表达对BxPC-3和PANC-1凋亡影响并不大,我们认为在黄芩素抑制胰腺癌的过程中NEDD9主要是调控增殖和侵袭途径。本研究深入讨论了黄芩素对胰腺癌细胞BxPC-3和PANC-1的作用机制,找到黄芩素靶向的基因之一,并进一步验证了下游的信号通路,为阐明黄芩素的抗癌机理提供了重要证据。综上所述,我们的结果表明,黄芩素是一种潜在而有效的治疗胰腺癌的药物。