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长期以来,直翅目学者都在探讨直翅目各类群之间的系统发育关系。虽然螽亚目和蝗亚目的单系性目前已被接受,但有的学者认为二者具有不同的分类等级;动物线粒体基因组由于它自身的一些特点,成为了研究基因组结构、功能和进化的最佳模型。目前GenBank收录的后生动物线粒体基因组1537种,其中昆虫纲116种。本研究采用了长PCR与嵌套PCR相结合的方法,对直翅目蝗总科的云南卡蝗(Carsula yunnana),斑腿勐腊蝗(Menglacris maculata)和柯氏无翅蝗(Zubovskia koeppeni)3种昆虫线粒体基因组进行了序列测定、组装和注释及结构分析。通过联合GenBank收录已测昆虫线粒体基因组数据和本实验室的已测直翅目昆虫,采用系统发育学研究方法,对直翅目昆虫系统发育关系进行研究,探讨不同联合数据集基因系统发育有效性。主要结论如下:1、云南卡蝗、斑腿勐腊蝗和柯氏无翅蝗线粒体基因组长度分别为15 444 bp、15 602 bp、15 815 bp;都编码13个蛋白质基因(COⅠ、COⅡ、COⅢ、ATP6和ATP8;ND1、ND2、ND3、ND4、ND4L、ND5、ND6和Cyt b),2个rRNA(lrRNA和srRNA),22个tRNA基因和一个A+T富集区。2、云南卡蝗、斑腿勐腊蝗和柯氏无翅蝗线粒体基因组碱基组成均具有A/T偏向性,其中,斑腿勐腊蝗偏向性程度最低,A+T含量为74%,云南卡蝗最高,A+T含量为76.1%。3、云南卡蝗、斑腿勐腊蝗和柯氏无翅蝗3个物种中发现COⅠ和ND5基因的起始和终止密码子存在异常。斑腿勐腊蝗COⅠ基因的起始密码子为ACC,终止密码子方面云南卡蝗和柯氏无翅蝗ND5基因为不完整的终止密码子,分别是TA和T。分析发现其它直翅目昆虫的蛋白质COⅠ基因起始密码子异常和不完整的终止密码子比较常见。4、云南卡蝗、斑腿勐腊蝗和柯氏无翅蝗3个物种的tRNASer(AGN)均缺失DHU臂,其余的tRNA基因均能形成典型的三叶草型二级结构。22个tRNA基因均存在一定数目的碱基错配现象,而且绝大部分为G-U错配。5、云南卡蝗、斑腿勐腊蝗和柯氏无翅蝗3个物种的lrRNA和srRNA全序列的二级结构进行了预测,结合已发表的蜜蜂、疑钩额螽等共10种昆虫lrRNA和srRNA全序列的二级结构比较发现,rRNA二级结构比较保守,只在序列两端差异较明显。6、22种直翅目昆虫的AT富含区域的长度不等,AT含量也从66.8%(驼螽)到87.3%(威廉姆剑角蝗)不等。比较发现蝗总科昆虫普遍存在保守模块BlockA,BlockB,BlocE1,BlocE2.其中BlocE1,BlocE2共同组成了轻链复制起始相关的二级茎环结构。螽亚目昆虫的保守模块不明显。7、利用线粒体基因组蛋白质编码基因对直翅目昆虫进行系统发育分析,绝大多数结果都支持直翅目中的蝗亚目和螽亚目分别为一个单系群。所有的结果都支持螽亚目中的螽蟖总科为一个单系群。在蝗总科的7个科中,日本蚤蝼位于基部分支,是祖先类群,锥头蝗科和瘤锥蝗科关系较近。斑翅蝗科显示出单系性,但斑腿蝗科、剑角蝗科和网翅蝗科的几个物种互相交替相聚,本研究不支持其各为单系群。