miRNA在乳腺癌诊断及预后中的作用初探

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目的鉴定与乳腺癌发生及进展相关的miRNA,尤其是与化疗效果相关的miRNA,建立通过miRNA表达水平预后乳腺癌的方法。方法我们利用定量PCR技术研究了miR-125a、miR-145、miR-155、miR-203、miR-210和let-7a在乳腺癌和乳腺增生中的表达水平,分析了上述miRNA表达水平与肿瘤大小、转移情况、生物学标志物表达情况的相关性。其中部分患者手术前采取FEC治疗方案辅助治疗,并比较化疗前后上述6个miRNA的表达差异。最后进行细胞实验比较乳腺癌细胞系在多柔比星、顺铂和紫杉醇的分别作用下上述6个miRNA的表达水平的改变。结果我们的实验结果表明miR-145在肿瘤组织中显著下调,而miR-155在肿瘤组织中显著上调;miR-125a与let-7a都和患者的年龄呈现很好的正相关关系;let-7a和肿瘤大小有一定程度的负相关;miR-155、miR-203和miR-210均在Ⅲ期肿瘤样本中表达较高,miR-203的表达与预期不相符合,在Ⅲ期乳腺癌中反而比Ⅱ期乳腺癌高;受限于样本数目,我们未发现所研究的6个miRNA与我们研究的生物学标志物的表达状况有显著相关性;比较化疗前后肿瘤组织miRNA表达水平的改变,我们发现化疗后miR-145表达升高而miR-210表达下降;最后,将培养的MCF-7、Bcap37、MDA-MB-468、MDA-MB-231和HCC1937细胞系用多柔比星、顺铂和紫杉醇分别处理,我们发现MCF-7细胞系用三种化疗药物的处理后都能明显上调miR-125a;在多柔比星和顺铂处理的MCF-7细胞中miR-145也呈现上调趋势;多柔比星处理Bcap37细胞系导致除了let-7a以外的5个miRNA都显著上调;顺铂处理Bcap37细胞系导致miR-210上调;紫杉醇处理Bcap37细胞导致miR-125, miR-145表达减少的同时miR-203表达增加;MDA-MB-468中,阿霉素处理导致miR-203轻微下调,顺铂处理导致miR-203上调而let-7a下调,紫杉醇处理导致miR-125a和miR-203下调,同时miR-155上调;MDA-MB-231细胞中,阿霉素诱导miR-145、miR-203和let-7a上调,顺铂诱导miR-145、miR-155和miR-203上调;HCC1937细胞中,阿霉素诱导miR-125a、miR-145、miR-203和let-7a下调,顺铂诱导miR-125a和miR-155下调同时顺铂能诱导miR-203上调,紫杉醇能诱导miR-125a、miR-145和miR-203下调。结论miR-145下调与miR-155上调可以作为肿瘤诊断的指标,患者乳腺组织miR-145下调和miR-155上调预示着有癌症发生的风险;miR-155和miR-210的高表达水平可以指示肿瘤是否已近进展至Ⅲ期以上;临床上FEC方案治疗后miR-145的表达水平显著升高而miR-210的表达水平显著下降,这提示这两个miRNA的变化情况很可能与患者化疗效果相关。细胞体外实验与体内实验差异较大,可能不适合通过细胞模型来研究体内miRNA表达水平与患者化疗效果的关系。
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