跑台训练对脑缺血损伤大鼠JNK信号通路和血管再生的影响

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【目的】通过观察跑台运动训练对脑缺血损伤大鼠脑组织中JNK信号通路及血管相关因子的表达的影响,探讨跑台训练通过JNK信号通路促进血管再生的机制。【方法】1、250-280g健康清洁级雄性SD大鼠,采用随机法分组:1.1、确定取材时间点分组:假手术组;运动3天组;运动7天组;运动14天组;运动21天组;运动28天组。每组8只。1.2、跑台训练及sp600125抑制剂干预处理分组:假手术组;MCAO组;运动组;抑制剂对照组;抑制剂组。每组12只。2、参考改良的Zea-longa线栓法,制备大鼠大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)脑缺血模型。3、所有实验大鼠均在术前接受3天的适应性跑台训练,除sham组和MCAO组除外,其余各组造模成功24h后开始跑台康复训练,每天30min。sham组和MCAO组同样每日置于跑台仪上,但不进行跑台。4、运动组分别于3d,7d,14d,21d,28d灌注取脑,通过western blot检测JNK信号通路在不同时间点的表达情况。5、用灌胃的方法从造模后第7d开始分别给M+E+SP组和M+E+C组JNK抑制剂SP60025和对照溶剂PPCES,持续7d。6、sham组,MCAO组,M+E组,M+E+SP组和M+E+C组分别于术后1d,3d,7d,14d予改良神经功能缺损评分和改良贴纸去除试验,来评价各组的大鼠的神经功能变化情况。7、术后14d后灌注取脑,通过western blot法检测JNK信号通路,v WF,VEGF的表达情况。用免疫荧光法检测缺血周边区VEGF的表达情况。【结果】1、运动组JNK信号通路的表达情况在第3d达到高峰,之后下降后再缓慢上升,在14d到21d处又达一个高峰,然后再慢慢下降。2、跑台训练具有促进大鼠受损神经功能的恢复,运动组m NSS评分与MCAO组相比明显降低(p<0.05),贴纸去除时间也比MCAO组少(p<0.05);跑台训练能促进JNK信号通路的表达,运动组p-JNK/JNK比值和c-jun的表达水平比MCAO组多(p<0.05);跑台训练还具有促进缺血周边区的血管再生的作用,运动组VEGF和v WF的表达水平也比MCAO组多(p<0.05)。3、JNK抑制剂SP600125干预后可明显抑制脑缺血周边区的血管再生相关因子VEGF和v WF的表达,抑制剂组VEGF和v WF的表达水平比溶剂对照组的少(p<0.05)。【结论】跑台运动可以促进MCAO大鼠神经功能的恢复,而其内在机制可能是康复训练促进JNK信号通路的活化,进而促进VEGF的表达,达到促进血管再生的作用。
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