tocilizumab对apoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化发生发展及ABCA1/G1表达的影响

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[目的]IL一6是一种多效性的细胞因子,与动咏粥样硬化的发生发展密切相关。为了验证在慢性炎症过程中,IL一6对动咏粥样硬化发生发展的影响,本研究拟在干酪素诱导的慢性炎症模型中,观察IL一6受体阻断剂tocmzulmab对fdpoE基因敲除(fdpoE-/-)小鼠ABCAl和ABCGl表达及动咏粥样硬化形成的影响,并对其机制进行探讨,以便明确IL一6在防治动咏粥样硬化中的作用。[方法]48只8周龄雄性fdpoE-/-小鼠随机分为四组,每组12只。所有小鼠部给予高脂高胆固醇饲料(15%猪油+0-25%胆固醇)饲养。基础组每天皮下注射0.5 m1蒸馏水,饲养至第14周处死;Tocmzumah处理组每天皮下注射0.5ml蒸馏水,自第9周开始每周给予Tocmzumah(8mg/kg)腹腔注射一次。炎症组每天皮下注射0.5ml干酪素饲养至第14周处死;Tocmzumah治疗组每天皮下注射0.5 ml干酪素,自第9周开始每周给予Tocmzumah(8mmg/kg)腹腔注射一次。采用酶联免疫法检测fdpoE-/-小鼠血浆C反应蛋白、TNFⅡ、IL一1p和IL一10水平;氧化酶法测定fdpoE-/-小鼠血浆甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量;免疫比浊法检测血浆载脂蛋白A—I和fdpoB含量;实时定量PCR检测fdpoE-/-小鼠主动咏、肝脏及小肠ABCAl和ABCGl基因表达;westetn印迹法检测apoE-/-小鼠主动咏、肝脏及小肠ABCAl和ABCGl蛋白质表达;冰冻切片油红0染色检测;apoE-/-小鼠主动咏根部横切面动咏粥样硬化斑块面积。[结果]酶联免疫法结果显示IL一6受体阻滞剂Tocilizumab显著降低apoE-/-小鼠血浆C反应蛋白、TNFⅡ和IL一1B水平,提高IL一10水平;血脂检测发现tocilizalmab处理组.apoE-/-小鼠血浆中的HDL—C、和fdpoA—I水平升高,而TG、TC水平降低;实时定量PCR结果显示tocilizumab增加;apoE-/-小鼠主动咏、肝脏及小肠ABCAl和ABCGl基因表达;Westeln]印迹法结果提示tociliz]amab增加apoE-/-小鼠主动咏、肝脏及小肠ABCAl蛋白质的表达。油红0染色结果显示tocilizlJmab减轻主动咏根部横截面的动咏粥样硬化病变。[结论]IL一6受体阻滞剂tocilizamab能够抑制apoE-/-小鼠体内炎症因子CRP、TNFa和IL 1B的表达,增加主动咏、肝脏及小肠ABCAl和ABCGl基因和蛋白质的表达,减轻慢性炎症对主动咏粥样硬化病变的影响。
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