目的: 肝纤维化是各种病因所致慢性肝病的共同病理过程,也是肝硬化发生的前奏和必经中间环节。在我国,以慢性乙肝引起的肝纤维化尤为多见,慢性肝病患者达3000万人以上,肝纤维化继续发展有25%~40%最终发展为肝硬化,严重影响患者的工作能力和生存质量,并引发肝昏迷、食管静脉曲张、肝腹水、肝癌等致命疾病。故研究如何延缓、阻断甚至逆转肝纤维化成为当前研究的热点。肝纤维化属中医“胁痛”“癥积”范畴,在目前西医药如秋水仙碱、D-青霉胺、己酮可可碱等治疗肝纤维化尚不理想的情况下,中医药治疗被寄予重望。抑肝纤是导师王继教授立足于慢性肝炎肝纤维化气虚血瘀、本虚标实的中医基本病机,结合临床与实验研究而组成的中药复方,具有益气活血、软坚散结的功效,在前期实验研究中业已证实其对肝纤维化有一定抑制、逆转作用。本实验采用四氯化碳(CCl4)法复制大鼠肝纤维化模型,对照观察抑肝纤及其组方中活血组、益气组、软坚组对大鼠肝纤维化的治疗效果,采用现代科学新理论、新方法,通过光镜病理观察、生化检测、免疫组化、病理学图像分析等,从多角度进行不同治则的比较研究,探讨并进一步论证中医不同治则抗肝纤维化的作用机制,为中医辩证治疗肝纤维化量化指标提供新的数据资料,从而为临床确立更加统一、客观的治疗原则提供参考,以期阻断肝纤维化病理进程,促其逆转而治愈大批肝病患者。方法:选用健康雄性Wistar 大鼠48 只,在正式实验前适应性饲养一周后,随机分为6 组,每组8 只,即正常对照组(N 组)、模型组(M 组)、抑肝纤组(C 组)、活血组(A组)、益气组(B 组)和软坚组(S 组)。除N 组外,其余5组进行模型复制,40%CCl4花生油溶液大腿内侧皮下注射,0.3ml/100g 体重, N 组注射等量生理盐水,每周2 次,持续8 周。各组在造模8 周后第二天起开始灌胃,抑肝纤组给予抑肝纤煎剂灌胃,1ml/100g 体重(含生药3g/ml),每日一次;活血组给予丹参、川芎煎剂灌胃,1ml/100g 体重(含生药0.69g/ml),每日一次;益气组给予黄芪、白术煎剂灌胃,1ml/100g 体重(含生药1.38g/ml),每日一次;软坚组给予鳖甲、牡蛎煎剂灌胃,1ml/100g 体重(含生药0.7g/ml),每日一次;正常组与模型组按1ml/100g 体重灌以蒸馏水,每日一次;共灌胃8 周。整个实验过程中自由进食普通饲料及饮水,并每周称体重一次以调节药量,整个实验持续16周。治疗8 周末,于最后一次给药后禁食12h,断头处死所有动物,迅速剖取肝脏,每次在肝左叶相同部位上取1cm×1cm×1cm 大小组织块,HE 染色及Masson 染色标本固定于10%中性甲醛溶液中,免疫组化标本固定于4%多聚甲醛和0.1%戊二醛混合固定液,逐级酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,5um 厚连续切片。其余的肝组织立即于-70℃冰冻保存。留取的标本分别进行以下项目检测:常规HE 染色光镜下观察肝组织病理学改变;Masson 染色观察胶原纤维增生情况,并采用病理图像分析系统测定胶原纤维面密度;比色法测定肝组织匀浆羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)含