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目的:利用化学及药理等研究手段,以青蒿工业药渣为研究对象,对药渣中的挥发油、黄酮及多糖类活性物质进行初步研究,并着重在功能性产品方面进行成品开发,实现对青蒿工业残渣的充分利用,为青蒿资源的综合开发利用提供参考。方法:1青蒿渣总黄酮的初步研究以单因素实验为基础,综合利用紫外一分光光度法、大孔树脂纯化等方法与技术,利用响应面法优化筛选出青蒿渣中总黄酮的最佳超声提取工艺。并以最佳工艺提取出青蒿渣总黄酮进行还原力测定、清除DPPH、清除羟自由基及油脂抗氧化的能力的测定,与抗坏血酸的抗氧化能力进行比较,评价其抗氧化能力;以及进行对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抗菌试验,观察青蒿渣总黄酮的抗菌效果。2青蒿渣总糖的初步研究以单因素实验为基础,综合利用紫外一分光光度法、大孔树脂纯化等方法与技术,采用响应面法优化筛选出青蒿渣中总糖的最佳超声提取工艺。并以最佳工艺提取出青蒿渣总糖进行还原力测定、清除DPPH、清除羟自由基及油脂抗氧化的能力的测定,与抗坏血酸的抗氧化能力进行比较,评价其抗氧化能力;以及用不同浓度青蒿渣总糖溶液对小鼠进行灌胃,1周后,利用二甲苯涂于小鼠耳廓造成急性炎症模型,观察不同浓度青蒿渣多糖对急性炎症的抗炎作用影响。3青蒿渣挥发油GC-MS分析采用水蒸气蒸馏法,提取青蒿原药材和青蒿渣中的挥发油,对比其含量变化,进行GC-MS分析,观察青蒿渣挥发油成分含量的变化,探讨青蒿渣挥发油是否仍具备药用成分。4青蒿香皂制备及其品质评价从青蒿渣中提取出挥发油、总黄酮、总糖3种活性成分,按照不同比例配方制备出青蒿香皂。并根据其产品外观,气味,以及对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的抗菌效果进行品质评价。结果:1青蒿渣总黄酮的初步研究1.1响应面法优化青蒿渣中总黄酮的超声提取工艺利用响应面法得到青蒿渣总黄酮的最佳提取工艺条件为液料比31.86:1(mL/g),乙醇浓度42.55%,超声温度80 ℃,总黄酮得率预测值为3.0740%。考虑实际操作,将实验条件修改为液料比32:1(mL/g),乙醇浓度42.5%,超声温度80 ℃,在此条件下进行3组平行试验,测得实际得率平均值为3.1768%,与预测值3.0740%相近,偏差较小。说明建立的方法有较好的预测性能,且工艺稳定可靠。并利用D101型大孔吸附树脂对所得的青蒿渣总黄酮进行纯化,纯化后总黄酮纯度可达63.01%。1.2青蒿渣中总黄酮的初步药效学研究1.2.1抗氧化能力测定:青蒿渣总黄酮浓度越高,其还原力越高,两者呈正相关线性关系;在清除DPPH能力测定中,青蒿渣总黄酮和抗坏血酸的IC50分别为12.79±0.03 mg ·L-1和6.36±0.12 mg ·L-1;在清除羟自由基能力测定中,及油脂抗氧化能力IC50分别为1090.50±3.61 mg·L-1和214.89±0.18mg·L-1;青蒿渣总黄酮对猪油具有明显的抗氧化作用,且该作用随总黄酮用量增加而增强,尤其在实验第5天,猪油氧化速率明显降低。说明青蒿渣总黄酮具有一定的抗氧化能力,但其能比抗坏血酸弱。1.2.2抗菌能力测定:青蒿渣总黄酮对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌效果,且随着浓度增大,抑菌效果越强。2青蒿渣总糖的初步研究2.1响应面法优化青蒿渣中总糖的超声提取工艺利用响应面法得到青蒿渣总糖的最佳提取工艺条件为液料比30.56:1(mL·g-1),超声时间28.94 min,超声温度70 ℃,总糖得率预测值为1.7538%。考虑实际操作,将实验条件修改为液料比30:1(mL.g-1),超声时间30 min,超声温度70 ℃,在此条件下进行3组平行试验,测得实际得率平均值为1.7733%,与预测值1.7538%相近,偏差较小。说明建立的方法有较好的预测性能,且工艺稳定可靠。并利用AB-8型大孔吸附树脂对所得的青蒿渣总糖进行纯化,纯化后总糖纯度可达51.93%。2.2青蒿渣中总糖的初步药效学研究2.2.1抗氧化能力测定:青蒿渣总糖浓度越高,其还原力越高,两者呈正相关线性关系;在清除DPPH能力测定中,青蒿渣总糖和抗坏血酸的IC50分别为30.69±0.04 mg ·L-1及6.39±0.12 mg ·L-1;在清除羟自由基能力测定中,及油脂抗氧化能力IC50分别为164.26±0.84 mg·L-1和214.89±0.18 mg·L-1;青蒿渣总糖对猪油具有较明显的抗氧化作用,能明显降低猪油氧化速率。说明青蒿渣总糖具有一定的抗氧化能力,且随其浓度增大,抗氧化能力越强,其中对清除羟自由基的能力比抗坏血酸更强。2.2.2急性抗炎能力测定:与空白(生理盐水)对照组对比,阳性(阿司匹林)对照组及青蒿渣总糖高剂量组对小鼠耳廓肿胀度均有极显著差异(p<0.01),说明两者均有较强的抑制炎症作用;且随青蒿渣总糖给药浓度增加,对小鼠耳廓肿胀抑制率也随之升高。3青蒿渣挥发油GC-MS分析结果表明,青蒿渣中挥发油是原药材的21.90%。通过GC-MS分析,青蒿挥发油共鉴定出74个成分,而青蒿渣挥发油则为70个成分,占挥发性成分的73.57%,与青蒿挥发油相比,其相对质量分数总和减少7.68%,相同的成分共有48个,有13个成分丢失,有9个新的成分出现,其中主要药用成分烯类、樟脑等成分都大多保留下来。4青蒿香皂制备及其品质评价制备出的含有各种不同成分的香皂,pH都介于7~9之间,硬度适中,加入青蒿挥发油的产品均有较浓烈的青蒿香气。并通过打洞法,对不同成分青蒿香皂对大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌进行抗菌实验测定,结果表明,所有青蒿香皂对大肠埃希氏菌均无抑菌效果,而对金黄色葡萄球菌均有抑菌效果,从抑菌圈大小上可知,添加活性物质成分对抑菌效果影响大小为:挥发油>总黄酮>总糖,且随着活性物质浓度的增加,抑菌效果越为明显,尤其是挥发油成分。结论:1青蒿渣总黄酮的初步研究通过响应面法得到提取青蒿渣中总黄酮的最佳工艺条件,建立的方法具有较好的预测性能,工艺稳定可靠。并通过药效实验,证明青蒿渣总黄酮具有抗氧化能力,以及抗菌作用,具有再开发利用价值。2青蒿渣总糖的初步研究通过响应面法得到提取青蒿渣中总糖的最佳工艺条件,建立的方法具有较好的预测性能,工艺稳定可靠。并通过药效实验,证明青蒿渣总糖具有抗氧化能力,以及明显的抗炎作用,具有再开发利用价值。3青蒿渣挥发油GC-MS分析通过GC-MS进行青蒿渣挥发油和青蒿挥发油成分的分析,证明青蒿渣挥发油的抑菌活性成分并未破坏,具有再开发利用价值。4青蒿香皂制备及其品质评价青蒿功能性香皂pH适中,外观品质较佳,对大肠埃希氏菌无抑菌作用,对金黄色葡萄球菌有较明显的抑菌作用,为普通抑菌香皂,且添加活性成分抑菌效果为:挥发油>总黄酮>总糖。