核酸适体作为一段寡核苷酸序列,具有亲和力高、特异性强、稳定性好、免疫原性低等特点,其在靶向药物、生物传感器、药物分离临床诊断等方面有广阔的应用前景。本课题利用EAQ3和B2两条对细菌内毒素表现了亲和力的序列特异性结合内毒素,达到分离去除内毒素的目的。通过PCR技术扩增EAQ3和B2序列,用扩增的得到的序列构建核酸适体-磁珠体系和核酸适体-膜体系,对两条序列的亲和力进行比对并进行内毒素分离操作。通过DNAMAN 6.0.3.99对两条序列进行二级结构分析,结果表明两条序列均形成了茎环结构,且所形成的环状结构数相同。对PCR体系和条件进行探索后扩增得到了EAQ3和B2序列的ssDNA。利用扩增得到的ssDNA制备核酸适体-磁珠体系,经过吸附动力学曲线拟合,EAQ3和B2序列在10分钟内对内毒素的吸附量分别达到1207 EU/g和991 EU/g,吸附效果良好,过程快速。核酸适体-膜体系分离内毒素的实验中,EAQ3和B2序列的最高吸附量也分别达到了1063 EU/mL和954 EU/mL。EAQ3理论最大吸附量比B2大9.9%,吸附平衡常数b比B2大30.5%。实验结果表明,相比B2序列,EAQ3序列在内毒素的分离应用方面表现了更好的亲和力,可应用于生物制品中内毒素的分离。