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【背景与目的】在信号传导过程中，蛋白质中酪氨酸的磷酸化以及去磷酸化是非常重要的环节。蛋白酪氨酸磷酸酶PTPs，是将磷酸化的信号分子的酪氨酸去磷酸化的激酶，同蛋白酪氨酸激酶PTKs一样在信号传导及控制细胞活性中发挥着重要的作用。SHP-2属于蛋白酪氨酸磷酸酶（Protein Tyrosine Phosphatase，PTPase）家族中的一员，是一种含有SH2结构域的酪氨酸蛋白磷酸酶，上个世纪九十年代由几个实验小组各自通过克隆的方法发现，分别命名为SHP-2、PTP1D、SH-PTP3、SH-PTP2以及Syp。SHP-2通过SH2功能域结合到酪氨酸磷酸蛋白质，使其自身结构中的PTP酶激活，从而作为下游信号分子参与信号转导，调节细胞增殖、分化、迁移、死亡，是细胞因子、抗原、细胞外基质等的下游信号分子。近年来的一些实验研究发现，SHP-2在正常造血细胞生长和发育的有关信号通路中起十分重要的作用，同时在肿瘤细胞的粘附、胚胎细胞的发育中起着十分重要的作用。众多研究表明，SHP-2在两个重要的信号途径PI-3K／Akt和Ras／Erk的上游将生长增殖信号传递给下游效应分子，正调控造血细胞的生长发育。PI-3K／Akt信号途径由于促进肿瘤细胞的增殖、生存和抗凋亡，已被证实在许多肿瘤的发生和发展过程中起着重要的作用。脂酰激醇-3-激酶（phosphoinositide 3-kinase，PI-3K）PI-3K是一种由110kDa催化亚单位和85kDa调节亚单位组成的异二聚体，包括2个SH2和1个SH3结构域，PI-3K激活与细胞骨架组装、细胞分化、抗凋亡及葡萄糖吸收有关，其下游为Akt。pAkt是Akt的磷酸化形式。PI-3K／Akt途径作为细胞内重要信号转导通路之一，通过影响下游凋亡相关蛋白、细胞周期调节蛋白等效应分子的活化过程，在细胞内发挥着抑制凋亡、促进增殖的关键作用。PI-3K／Akt通路分子的基因突变，或上游调控信号的异常放大，均可导致该通路过度激活，细胞生存与凋亡失衡，正常细胞发生恶性转化。近年来的研究发现，PI-3K／Akt通路的持续性活化在白血病发病中扮演着十分重要的作用。但目前国内关于SHP-2和PI-3K／Akt途径在急性白血病发病方面的文献还鲜见报道。本实验应用S-P免疫细胞化学法对急性白血病患者单个核细胞中的SHP-2、PI-3K、pAkt的表达及相关性进行了研究，探讨他们在急性白血病发病中的作用及与临床特征之间的关系。【材料与方法】采集58例初治急性白血病患者骨髓标本后，使用Ficoll淋巴细胞分离液分离单个核细胞置备细胞涂片，采用S-P免疫细胞化学法检测骨髓单个核细胞中SHP-2、PI-3K、pAkt抗原的表达水平，15名健康人为正常对照。1．研究对象：（1）初治白血病组（AL）：共收集标本58例，其中男35例，女23例，年龄14～75岁，中位年龄35岁。将全部急性白血病患者分为两组：①急性髓细胞白血病组（AML）41例，其中其中M0 2例，M2 23例，M3 7例，M4 3例，M5 3例，M6 2例，M7 1例；②急性淋巴细胞白血病组（ALL）17例；所有急性白血病患者均依据FAB分型诊断标准划分。（2）完全缓解组（AL-CR）：共35例，为初治组治疗后部分完全缓解的患者骨髓标本。（3）对照组（Control）：15例，为非恶性血液病骨髓正常者。所有观察对象均取自于2006年4月至12月郑州大学第一附属医院血液科门诊及住院就诊患者。2．标本处理：化疗前采集患者骨髓和对照者骨髓1ml，分离单个核细胞，制备细胞滴片，采用免疫细胞化学法检测SHP-2、PI-3K、pAkt的抗原表达在AL（Acute leukemia）、AL-CR及正常对照者骨髓单个核细胞中的表达。3．数据统计：实验数据用SPSS11.0软件进行统计学处理，SHP-2、PI-3K、pAkt的抗原表达阳性率比较采用χ2检验，变量间的相关分析应用Spearman等级相关分析，以a=0.05为检验水准。【结果】1 SHP-2在正常人骨髓标本中不表达或呈微弱表达。在AL组患者骨髓单个核细胞中84.5％呈现细胞胞浆中的阳性和（或）强阳性表达，其中AML组阳性率为82.9％，ALL组阳性率为88.2％，两组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。在AL-CR组中阳性率为31.4％，其中AML-CR组阳性率为29.2％，ALL-CR阳性率为36.4％，两者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。AL组与正常对照组，AL组与AL-CR组间差异有显著统计学意义（P＜0.01），且初治AML组与AML-CR组间及ALL与ALL-CR组间差异均有统计学意义（P＜0.05），AL-CR组与对照组间无统计学意义（P＞0.05）。2．PI-3K在正常人骨髓标本中不表达或微弱表达。在初治AL患者骨髓单个核细胞中81.0％呈现细胞浆的阳性或强阳性表达，其中AML组的阳性率为80.5％，ALL组的阳性率为82.3％，两组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。在AL-CR中阳性率为48.6％，其中AML-CR组阳性率为45.8％，ALL-CR组阳性率为54.5％，两者之间无统计学意义（P＞0.05）。AL组与正常对照组，AL组与AL-CR组间差异有显著统计学意义（P＜0.01），AL-CR组与对照组间差异无统计学意义（P＞0.05），且AML与AML-CR组间及ALL与ALL-CR组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。3．pAkt在正常人骨髓标本中不表达或微弱表达。在初治AL患者骨髓单个核细胞中60.3％呈现胞核或胞浆的阳性和（或）强阳性表达，以胞浆表达为主。其中AML组的表达阳性率为58.5％，ALL组阳性率为64.7％，两组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。在AL-CR组中阳性率为42.9％，其中AML-CR组阳性率为41.7％，ALL-CR组阳性率为45.5％，两者之间差异无统计学意义（P＞0.05）。AL组与正常对照组，AL组与AL-CR组间差异有统计学意义（P＜0.05）；AL-CR组与对照组间差异无统计学意义（P＞0.05），且AML与AML-CR组间及ALL与ALL-CR组间差异均有统计学意义（P＜0.05）。4．相关性分析显示PI-3K和pAkt呈正相关（r=0.477，P＜0.05）。5．相关性分析显示SHP-2和PI-3K呈正相关（r=0.338，P＜0.05）。6．SHP-2蛋白表达水平与患者的年龄、性别、FAB分型无明显相关性（P＞0.05），但与白细胞高低及髓外浸润特征呈正相关。【结论】1、SHP-2和PI-3K、pAkt在急性白血病细胞中呈过度高表达；2、SHP-2与白血病细胞恶性增殖程度密切相关；3、SHP-2和PI-3K／Akt信号转导途径的持续活化在白血病发病过程中起重要的作用，可能有望成为白血病靶向治疗的新的靶点。