【摘 要】
:
目的:本文以苦胆草为原料,研究了苦胆草多糖(andrographis paniculata polysaccharide,以下简称APP)的提取、纯化及抗氧化活性,并探索了其体外抗视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)的活性及机制。方法:1.APP的提取、纯化及抗氧化活性研究:依次使用石油醚及无水乙醇回流;采用水提醇沉法,在单因素实验基础上,响应面优化APP的提取条件;采用Sevag
论文部分内容阅读
目的:本文以苦胆草为原料,研究了苦胆草多糖(andrographis paniculata polysaccharide,以下简称APP)的提取、纯化及抗氧化活性,并探索了其体外抗视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)的活性及机制。方法:1.APP的提取、纯化及抗氧化活性研究:依次使用石油醚及无水乙醇回流;采用水提醇沉法,在单因素实验基础上,响应面优化APP的提取条件;采用Sevage法脱蛋白、活性炭脱色素后再分别以紫外及红外光谱扫描鉴定APP的纯度及成分;以DPPH·自由基清除实验检测APP的抗氧化活性。2.抗RB的活性与机制研究:采用CCK8方法检测APP对Y79细胞的抑制活性;利用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡试剂盒检测APP对Y79细胞的促凋亡作用;采用细胞周期检测试剂盒检测APP对Y79细胞周期的影响;Real-time PCR及western blot实验检测APP对Y79细胞中5个基因(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、CDK1及Cyclin B1)的表达情况。结果:1.APP的提取、纯化及抗氧化活性研究:实验结果表明:水提醇沉法最佳条件为料液比1:36.71(g/m L),提取温度63.73℃,提取时间7.38 h。为便于操作,提取工艺修正为:料液比1:40(g/m L),提取时间7.5 h,提取温度65℃,得多糖提取率为3.48±0.96%;紫外光谱扫描结果表明提取物的纯度很高;红外光谱扫描结果表明提取物成分为多糖;抗氧化实验研究表明,实验范围内,APP具有一定的抗氧化活性,DPPH·自由基的清除能力与其呈一定的剂量依赖关系,最大清除率为24.01%。2.抗RB的活性与机制研究:CCK8抑制实验结果表明:不同浓度的APP处理Y79细胞不同时间后,细胞出现了不同程度的增殖抑制,且具有浓度和时间依赖性;流式细胞术可见APP处理后Y79细胞凋亡率明显增高,被阻滞在G2/M期的细胞明显增多;进一步通过real-time PCR和western blot实验检测发现:APP处理组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9在转录和翻译水平的表达较对照组明显增加而CDK1及Cyclin B1的表达明显降低。结论:本文首次从苦胆草中提取出多糖成分,并在单因素实验基础上,响应面优化了APP的提取条件,获取了成分单一、纯度很高的APP,同时证明了APP具有抗氧化活性;体外细胞实验表明APP具有抑制Y79细胞增殖并诱导其凋亡的活性,其可能的作用机制为上调细胞凋亡信号通路中Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的表达及下调细胞周期信号通路中CDK1及Cyclin B1的表达来实现。本研究结果可扩大苦胆草的综合开发价值以及为RB的治疗研究提供新的方向。
其他文献
新能源产业发展对中国经济绿色转型有着重要意义,避免新能源企业非效率投资,促进整个行业的健康发展成为急需解决的重要问题。针对当前我国新能源企业的投资现状,选取中国A股上市的新能源企业2013-2018年度财务报告数据,检验了股权融资以及不同期限的债务融资对新能源企业非效率投资的影响。结果发现:股权融资手段虽为新能源企业发展提供了重要支撑,但是其作用并不显著;短期负债能对过度投资起到约束作用,而长期负
本文较详细地介绍了太阳能电池板铝膜电镀工艺.试验结果表明,铝膜电镀前经特殊处理,可得到结合力大于200kgf/cm~2的镀层.此处理工艺也适用于电刷镀.
【目的】通过对云南省2014-2019年云南省HIV/AIDS病例的研究,阐述了云南省HIV-1毒株的基因型分布和与人口有关的基因型分布,分析了云南省HIV-1毒株的遗传变异、系统演化和氨基酸变异,探究和朔源毒株流行地区和时间;寻找新型重组毒株。【方法】收集2014-2019年云南省16个地州(市)2800例HIV/AIDS患者的pol基因序列及流行病学信息,对云南省2014-2019亚型的总体分
在公路工程建设中,最为重要的就是做好施工阶段的质量管控,这样才可以保证公路在投入使用后的安全性、耐久性和行车舒适度。因此,作为工程监理,应该充分发挥自身监理责任,切实做好对施工阶段的全过程管控,杜绝任何质量安全问题的遗留。所以文章就对现阶段公路工程施工阶段的监理工作内容进行了分析,并提出了相关质量控制对策,以供参考。
目的:探究循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cells,CTCs)在监测肿瘤转移、评估疗效和预后中的应用。方法:选取2020年2月—2021年2月云南省第一人民医院乳腺甲状腺外科中接受手术治疗、辅助化疗、新辅助化疗及转移的女性乳腺癌患者。入选接受手术治疗、辅助化疗组的乳腺癌患者一共15例;入选接受新辅助化疗组的乳腺癌患者一共8例;入选转移组的乳腺癌患者一共11例。入选女性女性乳腺良
【目的】建立兔急性深静脉血栓形成(Deep vein thrombosis,DVT)模型,测量外周血清及血栓段血管周围组织中炎症因子水平,研究超声造影(Contrast-enhanced ultrasonography,CEUS)定量参数与炎症因子水平之间相关性,根据此相关性,快速、准确的诊断血栓形成,并评估血栓炎症反应,帮助临床早期诊断急性DVT并及时制定治疗方案。【方法】新西兰大白兔64只,假
目的探究长期抗病毒治疗的HIV/AIDS患者CD4+T淋巴细胞计数(CD4细胞)、CD8+T淋巴细胞计数(CD8细胞)和CD4+T淋巴细胞/CD8+T淋巴细胞比值(CD4/CD8比值)的长期变化趋势,以及影响CD4/CD8比值的因素,阐明HIV/AIDS患者的HIV-1 DNA动态变化及影响因素,并分析CD4细胞、CD8细胞、CD4/CD8比值与HIV-1 DNA的相关性,为HIV/AIDS患者的
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)激动剂匹立尼酸对癌旁肝组织氧化应激反应损伤的作用,研究其在VX2兔肝癌模型经导管肝动脉栓塞(TAE)术后对肝功能的保护机制。方法:建立兔VX2肝癌模型24只,并采用随机分组法分为3个组:即对照组8只;TAE组8只;联合治疗组(TAE术+匹立尼酸处理组)8只。联合治疗组在TAE术前3d、2d、和1d,连续经耳缘静脉注射匹立尼酸3mg/kg·d+1