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目的:探讨阿魏酸钠(Sodium ferulate,SF)对大鼠背根神经节神经元P2X3受体介导神经病理痛的作用。
方法:建立大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(Chronic constriction injury CCI)神经病理痛模型:I组为生理盐水对照组;Ⅱ组为假手术组;Ⅲ组为坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型组;Ⅳ组为CCI模型邯可魏酸钠处理组;V组为阿魏酸钠对照组。(1)通过疼痛行为学观察SF对CCI大鼠机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermalwithdrawal latency,TWL)的影响;(2)应用免疫组织化学方法、原位杂交方法和蛋白印迹方法观察大鼠L4/L5段背根神经节(DRG)P2X3受体的表达变化;(3)应用全细胞膜片钳技术了解阿魏酸钠对背根神经节神经元ATP激活电流的影响。
结果:(1)行为学;Ⅲ组较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组相比显示大鼠后足的机械和热痛敏阈值明显降低(p<0.05),Ⅳ组与Ⅲ组比较大鼠后足的机械和热痛敏阈值升高(p<0.05)。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组之间无明显差异。(2)免疫组化、原位杂交和蛋白印迹:Ⅲ组P2X3受体蛋白和P2X3mRNA的表达较Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组明显增加,有显著性差异(p<0.05),Ⅳ组与Ⅲ组比较P2X3受体蛋白表达(p<0.05)和P2X3mRNA表达(p<0.01)明显减少,有显著性差异。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组之间无明显差异。(3)Ⅲ组:DRG神经元细胞ATP激活电流与Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组比较明显增强(p<0.05),Ⅳ组较Ⅲ组ATP激活电流降低(p<0.05)。Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅴ组之间无明显差异。
结论:神经病理痛大鼠模型背根神经节神经元P2X3受体表达上调。通过整体、细胞及分子水平相结合的实验结果表明,阿魏酸钠对神经病理痛大鼠模型DRG神经元P2X3的表达上调引起的痛觉伤害性信息传递具有抑制作用。