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目的:由于广谱抗生素的广泛使用、免疫缺陷人群的增多等,使得临床真菌感染的发病率不断上升,念珠菌是医院感染的常见致病性真菌,近年来光滑念珠菌引起的真菌感染明显增多,由于光滑念珠菌对临床常用的三唑类抗真菌药物敏感性差,其耐药现象已成为临床治疗的难题。本研究收集临床分离的光滑念珠菌,检测其对氟康唑的耐药性,并对三唑类药物作用靶酶的编码基因ERG11和外排泵基因CDR1、CDR2和MDR1进行研究,以了解光滑念珠菌对氟康唑耐药的机制,为临床合理使用抗真菌药物提供依据。方法:1收集临床分离的光滑念珠菌98株,用M44-P纸片扩散法和M27-4微量稀释法检测光滑念珠菌对氟康唑的敏感性,以了解光滑念珠菌的耐药状况。2采用PCR技术对光滑念珠菌的靶酶基因ERG11编码区进行扩增,并对目的基因进行双向测序,测序结果与网上公布的标准序列比对,以研究ERG11基因突变与耐药之间的关系。3采用半定量RT-PCR技术,检测氟康唑耐药株与敏感株靶酶基因ERG11、外排泵基因CDR1、CDR2和MDR1的mRNA表达情况,以研究基因表达与耐药之间的关系。结果:1 98株光滑念珠菌中,8株对氟康唑耐药,耐药率为8.16%;剂量依赖性敏感株15株,所占比例为15.31%;敏感株75株,所占比例为79.53%。98光滑念珠菌对两性霉素B和5-氟胞嘧啶敏感率均为100%, 8株耐药株全部对伊曲康唑耐药,其中3株对伏立康唑耐药。2对ERG11基因的编码区进行测序,其结果与标准序列进行比对后发现光滑念珠菌耐药株和敏感株的ERG11基因共有8个点突变,分别为T866A、C1103T、T1280C、A1325G、C1640T、G1661A、T1931A和A2042G,均为同义突变,不引起所编码氨基酸的改变,其中5个点突变在敏感株和耐药株中均出现,分别为C1103T、T1280C、A1325G、C1640T和G1661A,2个点突变只出现在耐药株中,分别为T866A和A2042G,1个点突变只出现在敏感株中,为T1931A。3将耐药株与敏感株的ERG11、CDR1、CDR2和MDR1基因mRNA的表达水平进行比对,比对中发现,ERG11、CDR1和CDR2基因mRNA在耐药株中的表达均高于敏感株,MDR1基因mRNA的表达在耐药株与敏感株之间没有显著性差异。结论:1研究表明光滑念珠菌对氟康唑的耐药率为8.16%,并且三唑类药物之间存在交叉耐药现象,而对两性霉素B和5-氟胞嘧啶则有较好的敏感性。2研究未发现因ERG11基因突变导致所编码的氨基酸的改变,进而使光滑念珠菌对氟康唑产生耐药的现象,ERG11基因突变的意义有待进一步研究。3研究发现ERG11、CDR1和CDR2基因mRNA表达的上调是光滑念珠菌耐药性形成的部分机制,而MDR1基因在耐药性形成中的作用有待加大样本量进一步研究。