复方扶芳藤合剂口服结合BMSCs复合FG移植治疗对兔KOA软骨组织中FNmRNA的表达水平影响

来源 :广西中医学院 广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:IBMWiki
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目的:通过采用复方扶芳藤合剂口服液结合骨髓基质干细胞(BMSCs)复合纤维蛋白凝胶(FG)膝关节腔内移植对造模后证实惠有膝骨性关节炎的大白兔进行治疗5周后,测定膝骨性关节炎软骨组织中纤维连接蛋白(FN)mRNA的表达水平,以证明对修复关节软骨的作用,为临床上寻求一种新型、经济、实用、操作简单的中西医结合、标本兼治的治疗KOA的方法,并为下一步研究在临床上推广应用提供科学理论依据。  方法:抽取4-6周龄大白兔的骨髓,采用密度梯度离心法与贴壁法相结合体外分离、培养兔骨髓基质干细胞,培养至第三代。将43只大白兔采用石膏管型固定兔子右膝关节于伸直位6周制作兔KOA模型,处死3只证实造模成功后,将其余40只大白兔解除右膝石膏外固定随机分为A组(生理盐水灌胃组),B组(复方扶芳藤合剂灌胃组),C组(注射BMSCs+FG复合物组),D组(复方扶芳藤合剂灌胃+注射BMSCs+FG复合物组)每组10膝。用1ml注射器配7号针头进行右膝关节腔内注射,每周一次,连续5次。治疗5周后取各组兔右膝关节软骨,采用定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测不同治疗组之间软骨组织中FNmRNA的表达水平。  结果:①拆除石膏外固定后,各兔子右膝关节呈伸直状,关节僵硬无法屈伸,关节比正常稍大。解剖可见关节软骨色泽暗,部分呈米黄色,有龟裂或虫蚀样改变,滑膜增厚,关节面以内侧胫骨平台、股骨内裸改变明显。②.从骨髓中分离培养的细胞经密度梯度离心法并结合贴壁筛选法培养后贴壁细胞迅速增多,呈漩涡状生长,形成小圆梭形样细胞外观,体外培养生长稳定,增殖迅速,细胞形态与原代细胞基本相同。③检测各组兔KOA软骨组织中纤维连接蛋白(FN)mRNA表达水平,D组(复方扶芳藤灌胃+注射BMSCs+FG复合物组)的表达水平为0.369±0.199,较空白组有统计学意义(P<0.05)。  结论:(1)密度梯度离心法并结合贴壁筛选法培养兔骨髓基质干细胞取材容易,扩增方法可靠,增殖力强,便于移植。(2) BMSCs和FG复合材料结合复方扶芳藤合剂用于修复关节软骨局部缺损方面具有治疗效果。
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