胶红酵母Rhodotorula mucilaginosaTZR2014的分离鉴定及其在断奶仔猪上的应用研究

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本试验旨在从重庆不同的果园土壤中分离胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa),对分离所得的胶红酵母进行安全性检测,进而添加在断奶仔猪日粮中,研究胶红酵母对断奶仔猪的生产性能、器官指数、血液生化指标、空肠消化酶、肠道pH值、小肠肠道形态及微生物区系的影响。研究内容一:从重庆不同果园土壤中分离出胶红酵母,观察该酵母菌的菌落和个体形态特征,研究其生理生化特性,结合26S rDNA D1/D2区序列分析,鉴定为胶红酵母。研究内容二:对分离所得的胶红酵母进行安全性检测试验,选择20只体重相近(20.2g±0.02)的小鼠,进行急性毒理试验,按处理分为两个组,每个处理10重复,每个重复1只。对照组每天灌服0.1 mL生理盐水;胶红酵母组每天灌服0.1 mL 1.0×1010cfu/mL胶红酵母发酵液,连续灌服三天。结果表明,小鼠的活动、精神状态、采食都正常,体重没有显著变化(P>0.05),解剖观察小鼠的各个器官,没有出现病变。选择40只体重相近(20.5g±0.05)的小鼠,按处理分为四个组,每个处理10重复,每个重复1只。对照组每天灌服0.1 mL的生理盐水,二组每天灌胃0.1mL 1.0×107cfu/mL的胶红酵母发酵液,三组每天灌胃0.1 mL 1.0×108cfu/mL的胶红酵母发酵液,四组每天灌胃0.1 mL 1.0×109cfu/mL的胶红酵母发酵液。试验结果表明,在试验期间,小鼠的活动正常,没有异常现象,组四的小鼠体重和肝脏指数、脾脏指数显著高于其余三组(P<0.05),组三和组二的小鼠体重效果不显著(P>0.05),胶红酵母在小鼠体内没有发生易位。对胶红酵母进行抗酸、抗胆盐、抗高温和药敏试验。结果显示,胶红酵母能耐酸,耐胆盐,在65℃后的存活率大幅度下降,对青霉素不敏感,对氯霉素、四环素、卡那霉素、庆大霉素敏感。研究内容三:试验选取选购胎次相近,体重相近(7.42?0.06)kg的健康二元杂交去势28日龄断奶仔猪((荣昌猪)×长×大)30头,按处理随机分为3个处理,每个处理10个重复,每个重复1头,单栏饲养。试验采用单因素试验设计:(1)对照组(C);(2)产朊假丝酵母组(1?1010 CFU,每天3次),(3)胶红酵母组(1?1010 CFU,每天3次)。试验结果表明胶红酵母可显著提高断奶仔猪的末重、平均日增重、平均日采食量,降低料肉比(P<0.05)。在断奶仔猪日粮中添加胶红酵母后显著提高了血浆中总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活力(P<0.05),降低了丙二醛的活力(P<0.05)。对碱性磷酸酶、溶菌酶、一氧化氮合酶没有显著的效果(P>0.05)。各处理组的心脏指数、胰脏指数、肝脏指数、胸腺指数、肾脏指数、脾脏指数差异不显著(P>0.05),胶红酵母组淋巴结指数显著高于其余两组(P<0.05)。各处理组的空肠长度、回肠长度差异不显著(P>0.05)。胶红酵母组的空肠重、回肠重、回肠绒毛高度显著高于其余两组(P<0.05),回肠隐窝显著低于其余两组(P<0.05)。胶红酵母显著提高了断奶仔猪空肠的淀粉酶和脂肪酶的活力(P<0.05)。胶红酵母显著降低了拟杆菌门、变形杆菌门、放线菌门的数量(P<0.05),显著增加了厚壁菌门、疣微菌门、螺旋体门的数量(P<0.05)。胶红酵母对群落丰度和物种多样性效果不显著(P>0.05)。综上所述,胶红酵母能够提高断奶仔猪生产性能,增强消化酶活力,改善肠道微生物区系。因此,胶红酵母可以作为添加剂应用到断奶仔猪生产中。
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