论文部分内容阅读
目的:探讨低蛋白热量限制对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制。方法:采用高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法,建立2型糖尿病大鼠模型。将成模大鼠随机分为正常进食组(NP),低蛋白正常进食组(LP),低蛋白热量限制组(LP-CR),并设立正常对照组(NC)。LP-CR进食量为LP的70%。饮食干预4周后进行相关生理生化指标的检测,光镜下观察肾组织病理形态学的变化,计算肾小球系膜基质相对面积和肾小球足细胞相对密度。透射电镜下观察足细胞内自噬泡(包括自噬体及自噬溶酶体)数目,并计算肾小球基底膜厚度。用筛网法提取大鼠肾小球,并用免疫印迹法检测肾小球内微管相关蛋白1轻链3(LC3)、AMP活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p-AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)的蛋白表达水平。结果:(1)该2型糖尿病大鼠模型在注射STZ 6周后(饮食干预4周后)已出现糖尿病肾病的早期改变,包括微量白蛋白尿、肾脏肥大、肾小球系膜基质积聚、肾小球基底膜增厚等。(2)饮食干预4周后,LPCR组与NP组相比,空腹血糖、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、尿微量白蛋白/尿肌酐比值均明显降低(P值分别<0.01、<0.01、<0.05),肾脏肥大指数有所降低,但差异无统计学意义;糖尿病大鼠与非糖尿病大鼠间的血肌酐及内生肌酐清除率这两项肾脏功能指标均无明显差异(P>0.05)。(3)与NP组相比,LPCR组肾小球系膜基质相对面积和肾小球基底膜厚度明显减少(P<0.05),肾小球足细胞相对密度明显升高(P<0.05)。(4)透射电镜下观察足细胞内自噬泡数目,发现NP组和LP组明显少于NC组,LPCR组则明显多于NP组(P<0.05);与NC组相比,NP组肾小球内p-AMPK/AMPK比值明显降低(P<0.05),p-mTOR/mTOR比值明显升高(P<0.05),LC3-II/LC3-I比值有所降低,但差异无统计学意义;而与NP组相比,LPCR组肾小球内LC3-II/LC3-I比值及p-AMPK/AMPK比值明显升高(P<0.05),p-mTOR/mTOR比值明显降低(P<0.05)。结论:低蛋白热量限制对2型糖尿病大鼠肾脏具有保护作用,其机制可能与低蛋白热量限制影响AMPK/mTOR通路的活性,进而激活足细胞自噬有关。