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目的：了解阵发性睡眠性血红蛋白尿症(Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, PNH)患者WT1基因mRNA的表达水平,探讨WT1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)发病机制中的作用。方法·研究对象为天津医科大学总医院自2013年3月至2013年12月新诊断的PNH患者11例(其中经典型8例,AA-PNH患者3例)及正常对照8名。采用半定量RT-PCR方法检测CD59+BMMNC及CD59-BMMNC、正常对照BMMNC中WT1mRNA的表达情况,并分析其临床意义。体外培养PNH患者骨髓CD59-细胞,采用RNA干扰(RN A interference, RN Ai)技术敲低WT1基因的表达,应用流式细胞术检测敲低前后细胞周期、凋亡等生物学特征变化,进一步探讨WT1基因在PNH发病机制中的作用。结果：1.PNH患者CD59-细胞组、CD59+细胞组及正常对照组WT1mRNA的相对表达量分别为(1.06±0.12)、(0.90±0.12)和(0.86±0.05),CD59-细胞组明显高于PNH CD59+细胞组和正常对照组(P值均<0.05),而PNH CD59+细胞组和正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PNH患者WT1mRNA的相对表达量与CD59-细胞数量呈显著正相关(r-0.490,P<0.05),而与CD59+细胞数量无明显相关性。2.PNH患者骨髓CD59-细胞转染siRNA靶向基因WT1后,WT1基因被敲低,其mRNA表达水平下降；PNH患者空白对照组和siRNA-scr转染组细胞G0/G1期分别(92.73±3.71)%和(93.06±4.14)%,S期分别(6.99±3.61)%和(6.73±4.08)%；siRNA-WT1转染组细胞Go/G1期为(94.46±3.71)%,S期细胞减低为(5.40±3.55)%,该组Go/G1期和S期比例与空白对照组和siRNA-scr转染组比较差别均具有统计学意义(P<0.05)。siRNA-WT1转染组细胞凋亡率较空白组和siRNA-scr转染组凋亡率明显增加[(35.91±22.36)%VS(26.12±17.10)%VS(27.39±18.99)%](P<0.05)结论：PNH患者CD59-细胞中WT1基因高表达,提示该基因对PNH异常克隆可能起到促进其增殖的作用。siRNA-WT1能有效抑制PNH患者CD59-细胞中WT1基因的表达,WT1基因表达下降后,PNH异常克隆增殖能力减弱,凋亡增加。WT1基因过表达可能参与了PNH异常克隆的增殖过程。