【摘 要】
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目的城市化导致特定母乳细菌“消失”,引起婴儿肠道菌群和免疫发育滞后,与城市婴幼儿特应性皮炎（AD）高发有关。罗伊氏乳杆菌Fn041和格式乳杆菌Fn036是分别来自农牧地区和郊区的母乳源有益菌。本研究旨在探究母鼠给予这两种潜在益生菌预防子鼠AD的作用和机制。方法将BALB/C孕鼠分为CON组（灌胃PBS,健康对照）、AD组（灌胃PBS,模型对照）、AD+Fn041组（灌胃Fn041）、AD+Fn03
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目的城市化导致特定母乳细菌“消失”,引起婴儿肠道菌群和免疫发育滞后,与城市婴幼儿特应性皮炎（AD）高发有关。罗伊氏乳杆菌Fn041和格式乳杆菌Fn036是分别来自农牧地区和郊区的母乳源有益菌。本研究旨在探究母鼠给予这两种潜在益生菌预防子鼠AD的作用和机制。方法将BALB/C孕鼠分为CON组（灌胃PBS,健康对照）、AD组（灌胃PBS,模型对照）、AD+Fn041组（灌胃Fn041）、AD+Fn036组（灌胃Fn036）、AD+LGG组（灌胃鼠李糖乳杆菌GG,阳性对照）五组,自由饮食。从产前1周开始灌胃处理直至哺乳期结束,断奶后子鼠继续灌胃1周,益生菌灌胃量为1×10~9 CFU/天。在3周龄断奶后,给模型小鼠右耳涂抹卡泊三醇诱导AD,连续7天。禁食12小时后第8天处死小鼠,采集血液并收集脾脏、肠系膜淋巴结、耳朵等组织以供进一步分析与检测。结果表型指标分析显示,与AD组相比,Fn041和Fn036干预能缓解AD子鼠的耳朵厚度及红肿程度（p＜0.001）,降低肥大细胞和嗜酸性粒细胞的浸润（p＜0.001）,Fn041的作用优于LGG。Fn036和Fn041干预显著降低血浆IL-4（p＜0.05）和提高IL-12（p＜0.05）,也显著降低耳朵胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP,p＜0.05）。Fn041干预降低血浆中Ig E（p＜0.05）。Fn041干预显著升高回肠内容物分泌型免疫球蛋白A（s Ig A,p＜0.05）,LGG干预显著降低回肠s Ig A（p＜0.05）。流式细胞术分析显示,Fn041和Fn036干预显著提高肠系膜淋巴结调节性T细胞（p＜0.05）。定量PCR分析显示,Fn041以及Fn036干预显著上调子鼠结肠Clandin-2 m RNA表达,下调耳朵TSLP和IL-13 m RNA表达（p＜0.05）。盲肠16S rDNA扩增子测序分析显示,Fn041干预显著改变了菌群结构（β多样性）,显著提高了乳杆菌以及阿克曼氏菌的相对丰度（p＜0.05）。小肠派伊尔结转录组分析显示,Fn041干预激活了脂肪吸收和视黄醇（维生素A）代谢通路,去卷积分析显示调节性T细胞含量提高（p＜0.05）。血浆非靶向代谢组分析显示,AD组子鼠的血浆视黄醇以及色氨酸的浓度降低（p＜0.05）,Fn041处理后恢复健康水平,提高了犬尿氨酸（p＜0.05）的水平,LGG处理后提高了吲哚-3-乳酸（p＜0.05）的水平。盲肠内容物非靶向代谢组分析显示,与CON组相比AD组子鼠色氨酸的含量显著降低（p＜0.05）,但与AD组相比,Fn036处理后色氨酸的含量显著升高（p＜0.05）,而Fn041处理色氨酸的含量没有显著变化。结论罗伊氏乳杆菌Fn041和格式乳杆菌Fn036对小鼠特应性皮炎具有预防作用,Fn041的预防效果优于Fn036和LGG。其作用机制可能与调节Th1和Th2免疫反应平衡,增加肠系膜淋巴结中调节性T细胞比率,激活脂肪消化吸收和视黄醇代谢通路基因表达,诱导调节性T细胞增殖,增强免疫耐受有关。这些发现为特应性皮炎的预防提供了新的依据。
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