单链抗体2F3的分离纯化及定点突变对GPX抗体酶结构功能的研究

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该文以2F3单链抗体为对象,进行了如下3方面的研究:1.通过酶切和测序鉴定了克隆有单链抗体2F3基因的表达载体pTMF,分别采用不同表达宿主菌和诱导时间筛选出最适表达条件,在此基础上对基因工程单链抗体2F3进行表达.2.我们选择2F3单链抗体的重链CDR2、轻链CDR2、CDR3区的Ser作为突变位点,以没有反应活性并且不破坏附近区域结构的Ala置换Ser,研究突变体诱导后催化活力及对底物亲和力的改变,以此来确定2F3单链抗体催化残基的位置,为进一步的结构与功能研究打下必要的基础.3.我们应用比较成熟的同源比较预测原理,采用DOCKVISSION、MODULAR等商品软件,分别使用了三种不同的模板,对2F3单链抗体进行三维结构预测,得到了比较近似的预测结果.
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