豆渣及其蛋白、膳食纤维对2型糖尿病的干预作用及其机制研究

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2型糖尿病又称非胰岛素依赖型糖尿病,是由于患者胰岛功能部分缺失导致胰岛素抵抗或胰岛素分泌不足,以至于胰岛素得不到有效的利用、体内的胰岛素相对缺乏的多基因遗传性疾病。随着人们生活水平日益提高,全球2型糖尿病的患者也越来越多,2型糖尿病的治疗和预防迫在眉睫。饮食治疗在糖尿病综合治疗中占有重要的地位,正确地控制饮食、调节代谢可从一定程度上控制糖尿病的的发生和发展。豆渣是大豆制品(豆浆、豆腐、豆奶等)加工的副产物,产量很高且营养价值丰富,其主要成分为膳食纤维和蛋白质。但由于豆渣的含水量很高,很容易腐败变质,其利用率较低。近年来,许多学者研究发现,高膳食纤维、高植物蛋白膳食可起到良好的糖尿病辅助治疗的作用。豆渣作为膳食纤维和蛋白质的混合物,可能对2型糖尿病的病情发展起到一定的干预作用,但目前关于豆渣对2型糖尿病病情发展的干预作用及作用机制的研究较少。本课题以脱脂豆渣及其蛋白、膳食纤维改善2型糖尿病为切入点,以高脂饲料喂养结合小剂量STZ多次腹腔注射的方法构建2型糖尿病小鼠模型,对豆渣蛋白和膳食纤维的联合提取工艺进行优化,并对豆渣及提取成分进行分析,深入研究豆渣中蛋白质和膳食纤维等降血糖成分及其改善2型糖尿病的作用机理,探讨豆渣作为蛋白质和膳食纤维的混合物,是否具有比膳食纤维和蛋白质单一成分累加更好的功能效应。主要研究结果如下:(1)豆渣蛋白和膳食纤维的联合提取工艺研究,并对其理化性质进行分析。结果表明,固液比、提取p H、提取温度、提取时间对豆渣蛋白质、不溶性膳食纤维和可溶性膳食纤维的提取率均有影响,影响的大小顺序为:提取p H﹥提取温度﹥提取时间﹥固液比;豆渣蛋白、膳食纤维联合提取的最佳实验条件为:固液比1:20,p H=10,提取温度为65℃,提取时间为120min,该条件下提取出的豆渣蛋白、膳食纤维具有一定的抗氧化能力和溶胀能力。(2)2型糖尿病小鼠模型构建方法的研究,比较单次高剂量STZ腹腔注射和多次小剂量STZ腹腔注射两种造模方法造模成功率的不同,确定建立2型糖尿病小鼠模型的具体方法。结果表明,两种造模方法对小鼠的体重、进食量及空腹血糖均有显著性的影响,对饮水量的影响不显著,与较高剂量STZ一次注射的造模方法相比,小剂量STZ多次注射造模方法的成功率更高,更能对2型糖尿病病情的发生和发展进行模拟,为后续的糖尿病发病机理、药物或功能性食品对2型糖尿病的预防及干预作用的研究打好基础。因此,本实验将选择小剂量STZ多次注射(45mg/kg b.w.每次,连续4次)的方法进行2型糖尿病模型的建立。(3)构建2型糖尿病小鼠模型,对其分别灌胃脱脂豆渣、豆渣蛋白、豆渣总膳食纤维、豆渣不溶性膳食纤维和豆渣可溶性膳食纤维,通过检测进食量、饮水量、体重、空腹血糖、糖耐量、胰岛素耐量等指标,研究脱脂豆渣及其蛋白、膳食纤维对2型糖尿病的干预作用。结果表明,脱脂豆渣、豆渣蛋白、豆渣总膳食纤维、豆渣不溶性膳食纤维、豆渣可溶性膳食纤维均具有降血糖、干预2型糖尿病病情发展的作用。灌胃脱脂豆渣、豆渣蛋白、豆渣总膳食纤维、豆渣不溶性膳食纤维、豆渣可溶性膳食纤维后,2型糖尿病小鼠的糖耐受能力及胰岛素耐受能力得到改善,豆渣蛋白提高胰岛素敏感性的作用较为明显,其肝脏、肾脏、胰腺等内脏比重也发生了变化。(4)通过检测各组小鼠的糖代谢、脂代谢,抗氧化、炎症反应等相关指标,研究脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维对2型糖尿病的干预作用的机制。结果表明,脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维可以从糖代谢、脂代谢、抗氧化能力、炎症反应等方面对2型糖尿病病情进行干预。糖代谢方面,脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维均可降低2型糖尿病小鼠血清胰岛素水平、提高胰岛素敏感性、缓解胰岛素抵抗的症状,可以提高肝糖原含量、减少肝糖原的分解,还能影响胰岛信号通路中胰岛素受体和胰岛素受体底物的表达,从而对葡萄糖代谢产生影响。脂代谢方面,脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维可在一定程度上降低2型糖尿病小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的含量,但对甘油三酯水平和血清高密度脂蛋白胆固醇含量的影响不显著,还可以提高2型糖尿病小鼠血清载脂蛋白A1的含量,降低载脂蛋白B的含量。抗氧化能力方面,脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维可提高2型糖尿病小鼠肝脏总抗氧化能力(T-AOC)、SOD酶和GSH-PX酶的活性,降低过氧化产物MDA水平。炎症反应方面,脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维均可降低2型糖尿病小鼠血清TNF-α和IL-6炎症因子水平,提高其抗炎症能力。本研究深入探究脱脂豆渣及其蛋白质、膳食纤维对2型糖尿病的干预作用及作用机制,为2型糖尿病的饮食辅助治疗及大豆副产物的综合利用提供了理论基础。
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