长链非编码RNA FAM83H-AS1在贲门腺癌中的表达及其生物学作用的研究

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目的:研究长链非编码RNA(lncRNA)FAM83H-AS1在贲门腺癌组织及胃癌细胞系中的表达情况,并分析其表达与患者临床病理参数的关系。研究敲低lncRNA FAM83H-AS1后,对胃癌细胞系体外增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:1.使用实时荧光定量逆转录多聚核苷酸酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)的方法检测lncRNA FAM83H-AS1在60例贲门腺癌组织及其癌旁正常组织和四株人胃癌细胞系(BGC-823、SGC-7901、MGC-803、HGC-27)中的表达情况。2.设计合成特异性敲低lncRNA FAM83H-AS1的shRNA,通过脂质体转染的方法构建敲低lncRNA FAM83H-AS1的胃癌细胞BGC-823和SGC-7901,并通过RT-qPCR的方法检测转染效率。3.使用MTS、克隆形成的方法检测敲低lncRNA FAM83H-AS1后对胃癌细胞增殖能力的影响。4.使用划痕愈合实验检测敲低lncRNA FAM83H-AS1后对胃癌细胞迁移能力的影响。5.使用Transwell小室侵袭实验检测敲低lncRNA FAM83H-AS1后对胃癌细胞侵袭能力的影响。结果:1.LncRNA FAM83H-AS1在贲门腺癌组织及其癌旁正常组织中的表达:lncRNA FAM83H-AS1在贲门腺癌组织中的表达显著高于对应的癌旁正常组织中的表达,并且与TNM分期、淋巴结转移和组织分化程度相关(P均﹤0.05),但与年龄和性别无关(P均﹥0.05)。2.LncRNA FAM83H-AS1在胃癌细胞系中的表达情况:lncRNA FAM83H-AS1除在HGC-27细胞系中表达极低外其余细胞系中均呈高表达状态,其中以BGC-823细胞系表达最高。3.LncRNA FAM83H-AS1敲低质粒的筛选及敲低效率的验证:成功构建敲低lncRNA FAM83H-AS1的BGC-823细胞与SGC-7901细胞,使用RT-qPCR的方法验证敲低效率,两株细胞系中sh1转染组lncRNA FAM83H-AS1的相对表达量最低,敲低效率最高,差异具有统计学意义(P﹤0.05),以sh1质粒进行后续试验。4.敲低lncRNA FAM83H-AS1后对胃癌细胞增殖能力的影响:MTS和克隆形成试验结果显示,敲低lncRNA FAM83H-AS1后能抑制BGC-823细胞与SGC-7901细胞的增殖能力(P﹤0.05)。5.敲低lncRNA FAM83H-AS1后对胃癌细胞迁移能力的影响:划痕愈合实验结果显示,敲低lncRNA FAM83H-AS1后对BGC-823细胞迁移能力无抑制作用(P﹥0.05),可抑制SGC-7901细胞的迁移能力(P﹤0.05)。6.敲低lncRNA FAM83H-AS1后对胃癌细胞侵袭能力的影响:Transwell小室侵袭试验结果显示,敲低lncRNA FAM83H-AS1后能抑制BGC-823细胞与SGC-7901细胞的侵袭能力(P﹤0.05)。结论:1.长链非编码RNA FAM83H-AS1在贲门腺癌组织和胃癌细胞系中高表达,这可能与贲门腺癌的发生、发展有关。2.长链非编码RNA FAM83H-AS1可以促进胃癌细胞体外的增殖、迁移和侵袭能力,可能在贲门腺癌的形成及进展过程中发挥促进作用。
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