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目的:本研究旨在研究鸦胆子苦素D在体外培养条件下对人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢的影响及其可能的机制。方法:首先采用MTT法检测鸦胆子苦素D对MDA-MB-231乳腺癌细胞活力的影响,并使用顺铂作为细胞活力测定的阳性对照。接着检测鸦胆子苦素D对MDA-MB-231乳腺癌细胞有氧糖酵解过程的影响。通过葡萄糖试剂盒测量葡萄糖消耗量,通过乳酸试剂盒测量乳酸生成量,通过ATP试剂盒测量ATP含量。接着检测鸦胆子苦素D对乳腺癌细胞有氧糖酵解关键酶（己糖激酶,6-磷酸果糖激酶-1,丙酮酸激酶,乳酸脱氢酶）活性的影响。通过己糖激酶试剂盒测量己糖激酶活性,通过磷酸果糖激酶试剂盒测量6-磷酸果糖激酶-1活性,通过丙酮酸激酶试剂盒测量丙酮酸激酶活性,通过乳酸脱氢酶试剂盒测量乳酸脱氢酶活性。最后采用蛋白质印迹法检测鸦胆子苦素D对MDA-MB-231乳腺癌细胞中PI3K,Akt信号蛋白表达水平的影响,并将β-肌动蛋白作为蛋白质印迹法检测的内参。结果:MTT结果显示鸦胆子苦素D以时间和剂量依赖的方式抑制细胞活力,24、48和72小时的IC50值分别为41.44、7.07和2.42μM。能量物质测定结果表明不同浓度的鸦胆子苦素D（1、2、4μM）处理24小时后的ATP含量分别为1.71±0.04、1.43±0.04和1.24±0.03μM,均明显低于对照组（1.94±0.01μM）。不同浓度的鸦胆子苦素D（1、2、4μM）处理24小时后的葡萄糖消耗量分别为15.44±0.56、10.35±0.24和7.11±0.16mM,均明显低于对照组（17.60±0.18 mM）。不同浓度的鸦胆子苦素D（1、2、4μM）处理24小时后的乳酸生成量分别为20.98±0.42、14.87±0.39和10.48±0.45mM,同样明显低于对照组（23.53±0.28mM）。关键酶试剂盒检测的结果表明MDA-MB-231乳腺癌细胞中的四种有氧糖酵解关键酶活性受到鸦胆子苦素D不同程度的抑制。Western blot实验结果显示鸦胆子苦素D明显下调PI3K和p-Akt的表达,而对Akt的表达无明显作用。结论:鸦胆子苦素D可能抑制人乳腺癌MDA-MB-231乳腺癌细胞的抑制有氧糖酵解过程,细胞中的能量供应也可能因此大大的减少。这种抑制作用与鸦胆子苦素D抗增殖活性的关系很小,而可能与鸦胆子苦素D抑制PI3K/Akt信号通路有密切关联。