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目的：探讨脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus EMCV)的3C蛋白酶对真核细胞转录及翻译机制的影响。方法：构建真核表达载体EMCV-pcDNA3.1-3C, pEGFP-C3-3C,并分别用RT-PCR和Western Blot检测3C蛋白酶基因在细胞中的表达。荧光共聚焦显微镜观pEGFP-C3-3C的表达情况及定位。将pcDNA3.1-3C表达载体分别与帽样依赖的绿色荧光蛋白(GFP)表达载体pEGFP-N1共转染BHK-21细胞36小时,检测对GFP表达影响情况。将pEGFP-C3-3C表达载体与帽样依赖的萤火虫荧光素酶(Flue)载体pGL3载体共转染细胞36小时,48小时,72小时后,分别检测Fluc的表达。Western Blot检测不同滴度的EMCV病毒感染对真核生物翻译起始因子4GI (eIF4GI)及多聚A尾结合蛋白(PABP1)的影响。Western Blot检测pcDNA3.1-3C转染BHK-21细胞对真核生物翻译起始因子4GI(eIF4GI)及多聚A尾结合蛋白(PABP1)的影响。RT-PCR检测pcDNA3.1-3对GFP mRNA转录水平的影响。结果：成功构建真核表达载体pcDNA3.1-3C、 pEGFP-C3-3Co荧光共聚焦显微镜观测IMCV-3C蛋白酶可定位在细胞核。EMCV-3C蛋白酶可以抑制帽样依赖的GFP和Flue的表达。EMCV3C质粒转染和EMCV病毒感染均导致细胞内PABP1发生切割,而对eIF4GI均无明显作用。EMCV-3C蛋白酶还可导致GFP基因mRNA转录水平下降。结论：EMCV3C蛋白酶通过抑制：mRNA转录水平和PABP1的切割而抑制真核细胞帽样结构依赖途径的蛋白翻译,从而抑制蛋白质的合成。