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目的:本课题旨在运用现代分析技术研究苯磷硫胺片健康人体药代动力学特征。结合现有文献中的分析方法,建立准确、灵敏的测定苯磷硫胺片代谢物人全血含量的定量分析方法,根据相关指导原则设计苯磷硫胺片人体药代动力学研究试验方案,通过对测得血药浓度数据的计算、分析,对本品在中国健康人体的药代动力学特征作出评价。本课题为苯磷硫胺片在中国健康受试者中的耐受性、安全性和人体内的吸收、分布与消除和排泄的规律提供支持,为苯磷硫胺片II期临床研究制订合理的给药方案提供理论依据。方法:1、体内浓度测定方法的建立结合已报道文献与预实验结果,分别建立了高效液相色谱法测定全血中代谢物焦磷酸硫胺素（thiamine diphosphate,TDP）含量和液相色谱-串联质谱联用法测定全血中代谢物维生素B1的测定方法并分别进行两种方法的方法学研究。2、人体药代动力学试验设计根据《化学药品临床药代动力学研究指导原则》的规定,综合已报道苯磷硫胺片国外人体临床使用药理数据,制定科学、合理的中国健康人体苯磷硫胺片药代动力学研究的实验方案。3、人体药代动力学研究运用建立的生物分析方法,分别测定人体口服苯磷硫胺片后两种代谢物的含量,通过WinNonlin 6.3软件计算得出药代动力学参数,进行统计学分析,分别考察剂量、给药次数、食物、性别对苯磷硫胺片药代学力学参数的影响。结果:1、建立的HPLC法测定全血中TDP含量的方法的定量下限（low limit of quantity,LLOQ）达到15ng/mL,日内、日间精密度（RSD）均小于15%,准确度（RE）在-4.80%4.11%之间。LC-MS/MS法测定全血中维生素B1含量的方法的LLOQ达到1ng/mL,日内、日间精密度（RSD）均小于15%,准确度（RE）在-9.31%1.09%之间。2、所有受试者试验前均签署知情同意书,在人口学数据登记、病史询问、体格检查及试验室检查等一系列检查后,选择30名检查合格健康受试者（1931岁,男、女各半）随机分成3组,第1组为单次口服给药苯磷硫胺25mg,第2组为单次空腹或餐后口服给药苯磷硫胺50mg,清洗期为2周。第3组为单次口服给药苯磷硫胺100mg,24h后进入多次给药,每天给药1次,连续给药7d。单次、多次给药剂量组分别按各自采血点收集血样,置-80℃冰箱保存。3、健康受试者在服用苯磷硫胺片后体内TDP不呈线性药代动力学特征,男、女性别间无显著性差别;多次给药没有蓄积倾向,采用每次给药100mg,每24h给药一次的给药方式可较快获得较高的稳态血药浓度并维持至给药结束;饮食对其药代参数没有影响。健康受试者在服用苯磷硫胺片后体内维生素B1呈线性药代动力学的趋势,男、女性别间无显著性差别;多次给药没有蓄积倾向,采用每次给药100mg,每24h给药一次的给药方式可较快（第3d）获得较高的稳态血药浓度并维持至给药结束;饮食对其药代参数没有影响。结论:本课题采用血药浓度法进行苯磷硫胺片中国健康人体药代动力学研究。分别建立了测定人全血中TDP浓度HPLC法和测定人全血中维生素B1浓度LC-MS/MS法,所建立的检测方法灵敏度高、方便快捷,符合生物样品分析的测定要求,适用于苯磷硫胺人体药代动力学研究。药代动力学研究表明健康受试者在服用苯磷硫胺片后体内TDP不呈线性药代动力学的趋势,男女间无显著差异,多次给药无蓄积倾向,食物对药代参数无影响。健康受试者在服用苯磷硫胺片后体内维生素B1呈线性药代动力学的趋势,男女间无显著差异,多次给药无蓄积倾向,食物对药代参数无影响。