基于牛源HMGN2重组蛋白的体外抑菌试验研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:dingyi203
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
高迁移率非组蛋白(High mobility group chromosomalprotein,HMG)是脊椎动物和非脊椎动物的细胞核中含量最为丰富的非组蛋白家族(Bustin M,1996),这一家族的成员普遍存在于高等真核生物中,因其在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的高迁移率而得名。研究发现,HMG主要结合于真核细胞的活性转录基因的核小体区域内,在维持染色质活性结构,以及基因转录、复制等过程中起着重要作用。目前HMG分为三个亚家族,分别为HMGA、HMGB和HMGN。HMGN2为HMGN亚家族的成员之一,其基因位于染色体1q35,相对分子质量为9.2KD,共由90个氨基酸组成。   在80年代有不少学者从牛、鼠、兔等动物中分离提纯出HMGN2,并且对它的生物学活性进行了充分的研究,发现它不仅与维持染色体的结构(Marta Prymakowska-Bosak等,2001)、细胞的功能、基因的转录和活化过程(Lillian Medina等,1998;Crippa MP等,1993)有密切关系,随后还发现其具有很强的杀菌功能。因为抗菌肽的杀菌机制完全不同于传统的抗菌药物,因此HMGN2的抑菌机制受到广大学者的关注。   本实验设计引物从重组质粒PUC57-HMGN2扩增牛源HMGN2基因,构建PET-32a(+)-HMGN2和pGEX-KG-HMGN2重组表达质粒,经IPTG诱导原核表达后,在相同条件下重组表达质粒。pGEX-KG-HMGN2表达量大于PET-32a(+)-HMGN2。高表达量的重组表达质粒pGEX-KG-HMGN2,其表达产物在上清和包涵体中都有存在。通过制备包涵体并纯化包涵体的方式获取GST-HMGN2融合蛋白,SDS-PAGE电泳鉴定其分子量,并且通过Western-blot方法分析鉴定融合蛋白HMGN2免疫学活性。选用金黄色葡萄球菌ATCC25923;猪大肠杆菌E052(0-9102)、E126(O-138)、Wh1(O-74)、E107(O-161)、Wh3(O-139)、X002(O-11)、ETEC;鸡大肠杆菌O2、O78;鼠伤寒沙门氏菌;猪链球菌2型标准菌株,采用微量肉汤法和薄层琼脂糖孔穴扩散法检测其体外抑菌活性,结果表明纯化后的牛源HMGN2融合蛋白对猪大肠杆菌Wh3(O-139)和金黄色葡萄球菌ATCC25923均具有抑制作用,最小抑菌浓度分别为2.5μg/ml和5μg/ml且抑菌效果与浓度呈正比。
其他文献
新城疫病毒是世界公认的重要的禽类传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须通报的疫病。近年来,不断有报道在北美、欧洲及香港等地的水禽与活禽市场中分离到多株不同基因
摘 要: 本文探讨了建筑环境与设备工程实验室的建设,分析了实验室的现状,以及存在的问题,依据实验室的建设目标,提出了对实验室建设与管理的几点建议。  关键词: 建筑环境与设备工程 创新能力 实验室建设    近年来,那些刚刚走出校门的大学生就业形势严峻。为了使学生能更好地适应瞬息万变的信息时代,高校要努力提高学生的动手及创新能力。当今的大学毕业生在就业市场没有优势的主要原因是创新能力较低,实践性较
在采矿和加工工业部门,一般将筛面上按粒度分离(分级)的过程称作筛分,其作用和地位在现代选矿厂的工艺流程中愈来愈重要。目前不仅在破碎和磨矿工段安装筛子,筛分已渗透到工
摘 要: 随着我国高等教育大众化的不断推进,成人函授教育日益蓬勃发展。函授教育在创造良好的经济效益和社会效益的同时,却忽略了函授教育教学质量。本文通过阐述函授教育教学及现阶段函授教学过程中存在的弊端,提出了提高函授教学质量的具体措施。  关键词: 函授教育 函授教学 弊端 措施    随着我国高等教育大众化的不断推进,成人函授教育日益蓬勃发展,办学规模不断扩大,但函授教育在创造了良好的经济效益和社
摘 要: 随着大学本科教育的逐步改革,一些应用型的课程如金融学的教学内容已与过去大不相同。相应地,在教学过程中要求教师能在过去的基础上有所创新,在教学内容和方式等方面有所突破。本文作者就这些方面谈谈一些想法,并在借鉴新加坡管理大学教学经验的基础上提出一些可尝试的教学方法。  关键词: 大学本科 应用型课程 金融学教学    在之前很长的一段时间里,本科《金融学》课程在我国大部分高等院校的课堂中,讲
摘 要: 基层工会组织在构建和谐校园中有其优势,在构建和谐校园的过程中,基层工会组织要摆正自己的位置,找准切入点,抓住关键环节,突出重点难点,以发挥应有的作用。  关键词: 和谐校园 工会基层组织 优势 作用    构建和谐社会是我们党的奋斗目标,也是全国各族人民的共同理想。构建和谐校园,形成一个和谐、团结、向上的校园环境,是每位教职员工的共同心愿。在新的历史时期,基层工会组织在构建和谐校园中,如