前言 角膜病是我国常见的致盲眼病之一，占致盲眼病的第二位。在角膜疾病愈合修复过程中，许多细胞因子和生长因子参与组织修复调控，促进成纤维细胞增殖和新生血管形成，终致角膜新生血管(corneal neovascularization，CNV)形成。而CNV严重影响角膜透明性，成为角膜病致盲最常见的原因之一，同时又成为角膜炎、角膜移植排斥反应、角膜化学烧伤等疾病治疗的一个难题。因此，研究CNV的发病机制和通过不同途径干预其形成是各国学者关注的一大热点。大量研究表明，血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是眼部新生血管形成最重要的生长因子，研究其致病机制、抑制其表达将是21世纪治愈新生血管性疾病的希望。目前的研究发现白介素-18(interleukin-18，IL-18)在抑制肿瘤新生血管的形成中具有重要的作用，而在眼科领域IL-18与新生血管的形成中的作用国内外尚未见报道。鉴于此，本研究采用免疫组化的方法检测IL-18、VECF在正常角膜和血管化角膜、无血管病变角膜的表达，并对二因子进行相关性分析，试从细胞因子的角度探讨CNV的发病机制，为临床CNV的治疗提供理论依据。 实验材料 病例来源于2003年1月至2004年1月中国医科大学附属一院眼科角膜移植手术钻取下的血管化角膜23例，无血管化角膜15例，角膜移植取材后的供体剩余角膜10例；主要试剂和器材有兔抗人IL-18多克隆抗体、兔抗人VEGF多克隆抗体，SABC(兔IgG)试剂盒，免疫组化计算机图象采集及分析系统。 实验方法 将收集到的人角膜经抗冻剂处理后放人深低温冰箱(-80℃)编号保存，实验时将标本放人4O℃恒温水浴箱复温，进行现及免疫组化染色，检测IL一18、vEGF在正常角膜、血管化角膜、无血管化角膜的表达，分析二因子在每组表达的相关性。结果 免疫组化显示正常角膜组织中IL一18主要分布在上皮层、前弹力层、内皮层，以上皮层的表达最明显，VEGF在上皮层、前弹力层、和内皮层均有表达，前弹力层表达最强烈，基质层可见弱表达，IL一18在血管化的角膜标本中表达降低，而VEGF在该标本中上皮层、基质层均强烈表达，新生血管化区域、炎性细胞均呈现强阳性，IL一18在无血管病变角膜中有阳性染色，VEGF出现强表达，二者在各组中的表达均呈负相关，以血管化角膜标本中二者相关性最显著。讨论 透明、无血管是角膜的重要特征，这与角膜组织致密的结构和角膜本身含有血管生长抑制因子有关。既往对CNV发病机制的认识有炎症、缺氧、水肿等学说。最近有学者认为角膜组织中含有许多血管生成抑制因子，同时也含有血管生成刺激因子，二者的平衡表达维持角膜的透明和无血管。角膜损伤致平衡破坏，血管形成因子上调，最终可致角膜新生血管形成，透明性丧失，出现血管化，严重影响视功能。我们研究显示，正常角膜中都存在IL一18和VEGF一定量的基本表达，并且生理情况下IL一18抑制VEGF的过量表达。因此，二者间的平衡对于维持角膜自稳状态具有重要的作用。在圆锥角膜、角膜变性、大泡性改变等未出现新生血管的角膜疾病中IL-18的含量略微减少，虽然VEGF上调，仅参与以上疾病的修复，并不引起血管形成，提示在这些疾病中IL一18仍然对VEGF存在一定作用，抑制过VEGF度表达，从而抑制了新生血管的生成。而在血管化的角膜病变中，IL一18对VEGF的抑制作用完全被破坏，IL一18下调，VEGF迅速大量释放，促进内皮细胞迁移、增殖及血管渗漏，终致新生血管形成。由此可见，角膜复杂的因子网络中IL一18与VEGF之间的抑制关系扮演调节角膜生理、病理过程的重要角色。因而，IL一18抑制CNV深人研究为临床治疗角膜新生血管化提供了新途径。但VEGF在角膜具有的正常生理功能提醒我们不能完全抑制VEGF，如何合理地选择IL一18的浓度，调整VEGF生理和病理之间的平衡尚待进一步的研究。结论 一、IL一18、VEGF在正常角膜均有表达，且二者呈负相关; 二、IL一18在血管化角膜中表达降低，而VECF分泌显著升高，二者呈显著负相关;IL一18在无血管化角膜中表达略减低，VEGF升高，二者呈负相关:三、角膜新生血管的病理过程与IL一18及