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目的:通过鉴定与人胃癌密切相关的microRNAs(miRNAs)表达谱,初步筛选出在人胃癌细胞株中高表达的miRNAs;探讨miR-374b-5p、RECK与胃癌侵袭转移生长的关系,进一步阐明miR-374b-5p在胃癌发生、发展中的可能机制。方法:1.体外培养人胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803、NCI-N87和正常胃黏膜上皮细胞GES-1,分别提取总RNA进行miRNA芯片分析;qRT-PCR技术验证部分差异表达的miRNA。2.通过生物信息网络平台预测目的miRNA的作用靶点。设计合成has-miR-374b-5p ASODA,将其转染于人胃癌细胞株MGC-803,以空载体和无关寡核苷酸序列为对照。qRT-PCR检测转染效率;CCK-8法观察胃癌细胞转染后的生长情况;Trans-well小室法和划痕试验观察胃癌细胞转染后的侵袭和迁移影响;qRT-PCR验证RECK表达变化;Western Blot法验证RECK蛋白表达。结果:1.微阵列芯片可见,相对正常胃粘膜细胞GES-1,共有115个miRNAs在胃癌细胞株中存在两倍及以上差异表达;其中在NCI-N87细胞中27个miRNAs表达上调、25个miRNAs表达下调,在SGC-7901细胞中21个miRNAs表达上调、8个miRNAs表达下调,在MGC-803细胞中19个miRNAs表达上调、15个miRNAs表达下调。选取MGC-803细胞中上调表达的miR-374b-5p、miR-182-5p、miR-15-5p进行qRT-PCR验证,证明芯片结果基本可信。miR-374b-5p在MGC-803细胞中明显高表达。2.通过生物信息学分析发现,RECK可能为miR-374b-5p的靶基因。MGC-803细胞以Lipofectamin2000为转染试剂时,其转染效率在80%左右。转染miR-374b-5p抑制剂后,胃癌细胞miR-374b-5p表达显著降低。转染后miR-374b-5p抑制组较对照组的抑制率明显增高。转染hsa-miR-374b-5p抑制剂后细胞侵袭和迁移的能力均下降。qRT-PCR发现转染组较对照组RECK的mRNA明显上升;Western Blot法检测发现转染组RECK蛋白表达上升。结论:1.初步筛选出109个与人胃癌相关miRNAs。2.miR-374b-5p可能在人胃癌中高表达。3.miR-374b-5p可能通过RECK通路调控胃癌侵袭转移,并可能作为一种促癌基因参与胃癌的发生与发展过程。