烟草内生细菌多样性分析及其对烟草黑胫病的防治作用研究

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本研究在分析烟草内生细菌多样性的基础上,筛选出对烟草疫霉具有较好抑制作用的菌株,并测定拮抗菌株的生物学特性及其对烟草黑胫病的防治效果,取得的研究结果如下:   1、从广西百色市的12个烟草品种的48份标样中分离出470株烟草内生细菌菌株,经常规细菌鉴定方法和16s rDNA序列分析,获得的菌株分别属于肠杆菌属(Enterobacter,)、沙雷氏菌属(Serratia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、寡养单胞菌属(Stenotrophomnas)和假单胞菌属(Pseudomonas)。其中土壤杆菌属和肠杆菌属为烟草内生细菌中的优势种群。烟草内生细菌的类群随烟草种植地点、品种、器官和生育期的不同而不同。   2、烟草内生细菌种群数量随烟草器官和生育期的不同而异。根的含菌量最高,其次为茎,时含菌量最低。不同生育期烟草内生细菌的数量呈现出从缓苗期到旺长期逐渐增加,从旺长期到成熟期下降的趋势。   3、从470株烟草内生细菌菌株中筛选出对烟草疫霉有拮抗作用的菌株56株,其中菌株Y10的抑制效果最好,抑制率达91.48%,室内盆栽防治效果为68.72%。经形态、生理生化测定和16S DNA序列分析,菌株Y10被鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。该菌株生长最适pH为6.0-8.0,最适温度为30℃,能利用乳糖、D-果糖、D-木糖、葡萄糖、甘露醇、蔗糖、麦芽糖、山梨醇、纤维二糖、D-半乳糖、可溶性淀粉等碳源和牛肉膏、干酪素、酵母浸膏、大豆蛋白胨、硝酸钾、硫酸铵、氯化铵等氮源,最适碳源和最适氮源分别为甘露醇和酵母浸膏。此外,该菌株具有较宽的抑菌谱,对许多病原真菌都有一定的抑制作用。   4、菌株Y10能在烟草植株体内定殖,灌根接种处理后能从烟草的根、茎、叶组织中分离出菌株Y10。该菌株在烟草根组织中的数量为接种后1-5天增加,接种后5-30天逐渐减少。在烟草茎和叶组织中的数量为接种后1-20天增加,接种后20-30天逐渐减少.   5、Y10菌液与99%百里香酚原药以有效质量比1∶0.64混配,在盆栽和大田防治试验中对烟草黑胫病的防治效果分别为74.31%和45.46%。
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