利福平属于人类专用的广谱类抗生素,能够用于治疗多种细菌感染性疾病。该药物未被批准为动物用药,但因其价格低廉,来源广泛,抗菌效果好,因此,在水产品养殖中可能存在有非法添加使用的现象。利福平存在耐药率高、易出现毒副作用等特点,如果在水产养殖中滥用利福平,药物残留于食用水产动物中,通过食物链在人体内蓄积,对消费者的生命健康存在较大的安全隐患。然而,我国尚未建立关于利福平在水产品或相关动物性食品中的检测技术标准,从而无法对水产品中利福平药物残留实施监控。因此,开展利福平在水产品中残留的方法研究,以及研究利福平在罗非鱼体内的残留消除规律,对监管利福平药物在水产养殖中的违规使用、保障水产品的质量安全具有重要的理论与实际应用意义。试验通过对样品前处理方法、色谱条件和质谱条件的优化等方面的研究,建立了一种测定水产品中利福平药物残留的LC-MS/MS方法并对利福平在罗非鱼体内的残留消除规律进行了探讨。主要研究内容及结果如下:1、QuEChERS-HPLC-MS/MS测定水产品中利福平药物残留的方法研究样品直接采用纯乙腈提取,加入无水硫酸钠和内标利福平-D4,涡旋、超声提取后,氮吹干,初始流动相复溶后,经30 mg C₁₈与30 mg PSA分散固相萃取净化,经Inert Sustain Swift C₁₈色谱柱分离并以3 mmol/L乙酸铵溶液（含0.05%甲酸）和乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用多反应（MRM）监测正离子模式测定。结果表明:利福平在1.0～250μg/kg浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r≧0.9994,方法检出限为0.3μg/kg,定量限为1.0μg/kg,在罗非鱼、南美对白虾、中华鳖的1、20、200μg/kg 3个浓度水平进行加标回收试验,平均回收率在93.6%～105.2%之间,日内精密度在3.15%～5.94%之间,日间精密度均低于9.31%。所建立方法操作简单、快速、灵敏、准确能适用于水产品中利福平残留的确证和定量分析。2、利福平在罗非鱼体组织中分析方法的建立本研究建立了利福平在罗非鱼体不同组织中的分析方法:利福平在血浆、肌肉、肝脏、肾脏组织的方法检出限分别为3.0μg/L、0.3μg/kg、0.3μg/kg和0.6μg/kg,定量限分别为10μg/L、1.0μg/kg、1.0μg/kg和2.0μg/kg,罗非鱼各组织中利福平的平均回收率在95.0～105.2%之间,日内与日间的RSD分别低于5.21%与9.31%。该方法能适用于利福平在罗非鱼体内血浆、肌肉、肝脏、肾脏组织中的确证与定量分析。3、利福平在罗非鱼体内的消除规律研究以40 mg/kg单剂量口灌给药后,利福平在罗非鱼体内血浆、肝脏、肾脏组织的药时曲线符合一级吸收一室模型,肌肉组织的药时曲线符合一级吸收二室模型,RIF在各组织中主要的药代动力学参数为:血浆、肌肉、肝脏、肾脏组织中的T_max分别为:6.750、6.539、6.062、6.680 h;T_1/2β分别为8.653、10.542、7.908、8.509 h;C_max分别为:1.566、0.087、2.691、1.181μg/m L或μg/g。以40 mg/kg剂量连续5天口灌给药后,利福平在罗非鱼体内血浆、肌肉、肝脏、肾脏组织的药时曲线符合非房室模型,RIF在各组织中主要的药代动力学参数为:血浆、肌肉、肝脏、肾脏组织中的T_max均为6.0 h;T_1/2β分别为9.372、11.816、8.692、9.315 h;C_max分别为:2.438μg/m L、0.141、3.953、1.664μg/g。单剂量给药与多剂量给药后在血浆、肌肉、肝脏、肾脏组织中利福平的药物浓度在6～7 h均能达到峰值,体内残留时间较长,单剂量组与多剂量组在相同组织中的T_1/2β、C_max结果相比差异不大。本研究建立了一种测定水产品中利福平药物残留的LC-MS/MS方法以及研究了利福平在罗非鱼体内的消除规律,为保障水产品的质量安全提供了技术支撑,同时为监管利福平在水产养殖中的违规使用提供了一定的理论依据。