Egb诱导体外培养的胎儿血管平滑肌细胞凋亡的实验研究

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目的 观察Egb对体外培养的胎儿主动脉血管平滑肌细胞的诱导凋亡作用。 方法 采用消化结合组织贴壁法培养胎儿主动脉血管平滑肌细胞。加入终浓度分别为0μg/ml、200 μg/ml、400μg/ml、800 μg/ml的Egb分别干预6h、12h、24h三个时间段,观察细胞凋亡现象,并用Annexin—V(Fitc标记)结合PI染色,流式细胞技术检测早期凋亡细胞率。并进一步检测凋亡细胞的Fas及Bcl-2的表达量的变化。 结果 在相差显微镜下,出现细胞收缩、体积变小、变圆、胞膜出现气泡等凋亡现象。Gimsa染色及电镜观察可见凋亡小体等凋亡现象。流式细胞仪检测早期凋亡细胞率,随着时间的延长及Egb药量的增加,早期凋亡细胞率逐渐增加。3×4析因分析结果显示有统计学意义,可以认为随着时间的增加及Egb量的增加,凋亡率不断增加,同时在凋亡相关蛋白的检测中我们发现随着时间的延长及Egb药量的增加,Fas表达量增加,同时Bcl—2的表达量减少。 结论 Egb可以诱导体外培养的血管平滑肌细胞凋亡,且随着时间的增加及Egb量的增加,凋亡率不断增加。随着平滑肌细胞凋亡率的增加,Fas表达量增加,同时Bcl—2的表达量减少。
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