表面增强拉曼光谱技术诊断急性心肌梗死的实验研究

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目的通过应用表面增强拉曼光谱(surface-enhanced Raman spectroscopy,SERS)技术检测、分析并比较心梗患者和正常人血清光谱差异,探讨其诊断急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的可行性。方法选取2013年9月至2014年3月于我院就诊,胸痛、胸闷时间不超过12h,疑似急性心梗的患者。其中符合WHO诊断指南,临床确诊为急性心梗患者32例设为实验组,同时选取体检健康者32例设为对照组。在他们知情同意的条件下,抽取每人3ml外周静脉血,以3500r/min离心10分钟后取上清。采用SERS技术检测两组血清,利用WIRE 2.0(Renishaw)软件包收集和分析得到的光谱信号,分别获取两组的平均SERS光谱,主要的谱峰以及两组的差谱。然后联合应用主成分分析法(Principal Component Analysis,PCA)与线性判别分析法(Linear Discriminant Analysis,LDA)对心梗组和正常组进行判别,得到SERS检测法的灵敏度和特异性,最后运用受试者工作特征(receiver operating characteristic curve,简称ROC曲线)测试法验证PCA-LDA分析法的有效性。结果两组血清主要的SERS谱峰分别在拉曼频移为494,591,640,731,813,888,960,1006,1074,1095,1135,1206,1330,1450,1580,和1656cm-1的位置,谱峰可能的归属见表2;对比心梗组和对照组的血清平均SERS光谱发现,在494,640,和1656 cm-1位置,AMI组的拉曼信号比对照组高,然而在731,1330,和1450 cm-1位置,AMI组的拉曼信号比对照组低。联合应用PCA-LDA统计学方法分析发现,SERS技术诊断急性心梗的灵敏度为87.5%,特异性93.8%;ROC曲线下面积为0.933,证明我们构建的PCA-LDA诊断模型有效。结论表面增强拉曼光谱技术对急性心梗的诊断价值高,具有一定临床应用价值。另一方面,它能够从生物分子水平对急性心梗进行探讨,对我们研究急性心梗发生后的机制可以提供有力的帮助。通过SERS检测血清的方法很有希望发展为一种AMI早期诊断及机制探讨的工具。
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