浒苔多糖γ射线辐照处理及其对肉仔鸡生产性能、抗氧化和肠道屏障功能的影响

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肉鸡的肠道疾病对肉鸡养殖业造成很大的损失,因此维持肉鸡肠道健康对发挥肉鸡最大的生长性能具有重要作用。而浒苔多糖(Enteromorpha polysaccharide,EP)作为绿藻浒苔的主要活性成分,应用在动物生产中具有提高生长性能、增强免疫力和保护肠道健康的作用。其生物功能与分子结构、分子量密切相关。而辐照处理能够破坏多糖的糖苷键,降低多糖的分子量,暴露多糖的官能团,从而提高多糖的抗氧化作用。因此,本试验在探索γ射线辐照对浒苔多糖分子量、分子结构等理化特性和体外抗氧化活性影响的基础上,研究辐照浒苔多糖对肉仔鸡生产性能、抗氧化和肠道屏障功能的影响。本研究分为两部分。试验一γ射线辐照对浒苔多糖理化特性和体外抗氧化活性的影响本试验旨在探讨不同剂量γ射线辐照处理对浒苔多糖分子量等理化性质和体外抗氧化活性的影响,采用源强度为2×10~6Ci的Co60γ射线为辐照源,剂量率为4 Gy/s,辐照剂量依次为25、50、100、150 kGy,得到4组辐照处理的EP。以未经辐照的EP为对照,分析其修饰前后多糖的分子量等理化性质,筛选出高抗氧化活性的辐照处理浒苔多糖。试验结果如下:1)与对照组相比,辐照样品数均分子量(Mn)和重均分子量(Mw)随着辐照剂量的增加而降低(P<0.05),多分散性稍降至1.25左右,并在不同剂量处理下维持在一个相对恒定的水平;2)不同辐照剂量处理后的EP样品具有相似的FT-IR图,说明γ辐射没有显著影响EP的官能团状态;3)扫描电镜观察显示,对照组EP是一个个大小不同的完整球体,辐照处理后,样品的碎片比未处理样品的小,并且小碎片的数量随着辐照剂量的增加而增加;4)辐照剂量为25、50、100和150 kGy时,EP的溶解度分别为99.10%、99.50%、99.82%和99.90%,而剂量为0 kGy时,EP的初始溶解度为98.70%;5)辐射处理后,EP清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基(O2·-)的能力显著增强,且以150 kGy剂量处理最高;辐照剂量为150 kGy时,EP清除羟基自由基(HO·)能力显著增强。综上所述,150 kGy辐照的EP具有最好的抗氧化生物学功能,因此选择150 kGy辐照的EP(IEP)进行下一步的动物实验。试验二辐照浒苔多糖对肉仔鸡生产性能、抗氧化和肠道屏障功能的影响试验选取300只健康、体重相近的1日龄AA肉鸡,随机分为3个处理组,每组10个重复,每个重复10只鸡。3个处理组分别为:对照组、浒苔多糖(EP)组、γ辐照浒苔多糖(IEP)组,对照组饲喂基础日粮,EP组在基础饲粮中添加400 mg/kg EP,IEP组在基础饲粮中添加400 mg/kg IEP,试验期21天。试验结果如下:1)三组间生长性能ADG、ADFI和RCR差异不显著,但IEP组21日龄体重(P=0.053)和平均日增重(P=0.054)较对照组和EP组有增加趋势;2)与对照组相比,EP和IEP组血清T-AOC(P<0.05)和SOD(P<0.05)活性均显著升高,此外,IEP有增高血清CAT活性的趋势(P=0.056);与对照组相比,IEP组回肠CAT mRNA水平显著升高(P<0.01),EP组回肠GPx2(P<0.05)、HMOX1(P<0.05)、Nrf2(P<0.05)和Keap1(P<0.05)mRNA相对水平显著升高;3)在三个组别中,IEP组的回肠绒毛高度(P<0.01)和绒毛高度/隐窝深度比值(P<0.01)是最高的;EP组回肠Mucin-2(P<0.01)和Occludin(P<0.05)基因表达量高于对照组,IEP组回肠Occludin(P<0.01)基因表达量高于对照组;4)在回肠组织中,与对照组相比,添加IEP显著抑制了炎症相关因子NF-κB(P<0.01)、HSP70(P<0.01)、HSP90(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)、IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.05)和IFN-γ(P<0.05)的mRNA水平,添加EP显著降低了HSP70(P<0.01)、HSP90(P<0.01)和IL-1β(P<0.05)的mRNA水平;5)在盲肠微生物群落中,与对照组相比,添加IEP显著增加了Chao1(P<0.05)、ACE(P<0.05)和Shannon(P<0.05)指数,IEP和EP均显著降低了Simpson(P<0.05)指数;在β多样性方面,Venn图显示三组共有的OTU为417个,Con、EP和IEP组独有的OTU分别有18、7和31个,主坐标分析(principal coordinate analysis,PCA)显示三组样本间细菌群落紧密聚集;在属水平上,与对照组相比,IEP显著提高Barnesiella(P<0.05)、Negativibacillus(P<0.05)和Rikenella(P<0.05)的丰度,EP显著提高Alistipes(P<0.05)的相对丰度;6)三组间盲肠乙酸、丙酸、丁酸、戊酸酯无显著差异(P>0.1)。综上所述,辐照浒苔多糖(IEP)在不影响其提高肉仔鸡抗氧化功能的基础上,能改善肉仔鸡回肠形态,使肉仔鸡回肠保持在低级别炎症水平,促进盲肠微生态平衡,这有助于进一步认识辐照增强EP功能的作用,并为辐照多糖添加剂的生产和应用提供依据。
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