【摘 要】
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蜘蛛丝在生物材料和组织工程领域激起了很大的研究兴趣,本室已利用基因工程方法构建了含有特定细胞黏附信号识别功能的RGD-三肽的重组蛛丝蛋白多聚物pNSR-16/BL21(DE3)plysS,在
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蜘蛛丝在生物材料和组织工程领域激起了很大的研究兴趣,本室已利用基因工程方法构建了含有特定细胞黏附信号识别功能的RGD-三肽的重组蛛丝蛋白多聚物pNSR-16/BL21(DE3)plysS,在工程菌摇瓶培养和发酵培养工艺的基础上,采取Do-stat分批补料培养,选择高密度发酵过程中pH、温度、诱导剂和前体物甘氨酸/丙氨酸浓度四个因素,通过正交实验设计对发酵工艺多因素条件进行优化,确立了蛛丝蛋白基因工程菌10L发酵罐高密度发酵的最佳工艺条件。以基因重组蛛丝蛋白为基础原料,与聚乙烯醇多聚物共混,制备组织工程多孔薄膜支架材料。从原核细胞分离纯化重组蛋白,细胞裂解的同时细菌细胞壁内的内毒素也随之释放出来,对蛛丝蛋白支架材料在组织工程学方面的应用有所影响,本文采用物理和化学方法去除内毒素,达到了医学材料的要求。考察了支架材料与细胞的生物相容性,采取NIH3T3细胞与作为细胞外基质的支架材料体外联合培养评价体系。对蛛丝蛋白pNSR-16和天然高分子pNSR-Z支架材料浸提液的生物相容性进行判断,进而考察了支架与NIH3T3细胞的复合培养,评价了二者的黏附及其调节。浸提液实验组和对照组相比,细胞生长没有受到抑制,细胞在材料上粘附生长,实验结果说明蛛丝蛋白材料和细胞之间存在良好的生物相容性。
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