心肌梗塞以及充血性心力衰竭等心脏类疾病一直有很高的死亡率,此类疾病都伴随着大量的心肌细胞死亡以及心脏功能的减退,其他心脏疾病如心率不齐等症状、心脏药物筛选等,都需要一个理想的体外组织模型,来了解细胞移植后心肌功能的改善和心机细胞肥大的减缓,以及细胞移植对干细胞心肌向分化、心肌成纤维细胞增殖分化的影响或者药物的有效性等。心脏修复中应用较广泛的是细胞移植疗法,此方法旨在使用细胞改善心脏功能或者是修复受损的心肌层。多种类型的细胞可以应用于心脏修复,并且都取得一定效果,但是这些方法都有不同的缺点,比如细胞在宿主体内的存活、分化以及与原组织的交联。心肌干细胞(Cardiac Stem Cells,CSCs)具有成体干细胞特性,并且自体移植不会发生免疫排斥反应,因此,心肌干细胞是构建工程化心肌组织的理想细胞来源。利用心肌干细胞、心肌细胞及心肌成纤维细胞作为种子细胞,发展一种体外的心肌组织模型,为完善心肌损伤的细胞移植疗法、认识组织力学环境对种子细胞的增殖分化的影响、药物干预心脏的功能提供了可能的体外模型。Matrigel包含多种ECM蛋白以及生长因子,可以作为构建3D心肌组织工程的理想材料。本文主要探究在力学环境下,体外构建3D工程化心肌组织。将Matrigel与DMEM培养基按照不同比例稀释,将心肌干细胞,心肌细胞以及心肌成纤维细胞按照按一定的比例与Matrigel工作液混匀。使用FlexCell力学加载设备,首先将六孔组织培养版形成凹槽,然后将混合均匀的细胞加到凹槽中,待静置40分钟后,3D组织构建成功,然后静置培养2-3天,再使用FlexCell力学加载设备进行拉力加载,体外构建3D工程化心肌组织。通过合适的力学加载、细胞比例及数量、3D凝胶的稀释比例,构建3D微心肌组织,发展了在体外构建3D心肌组织的方法,为构建心肌组织用于体外研究心肌损伤等疾病的研究,奠定可用的组织模型。本文共分为四章进行介绍,第一章为绪论,综合介绍了心肌梗死以及当前最主要的治疗方案;第二章为种子细胞的分离纯化培养及鉴定工作;第三章使用FlexCell力学加载系统,构建3D工程化微心肌组织,并对微心肌组织进行心肌细胞检测;第四章为全文总结以及工作展望。