【摘 要】
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水稻条纹叶枯病毒(rice stripe virus, RSV)是单链负义编码的RNA病毒,它能引发水稻条纹叶枯病,导致水稻产量严重下降.这种病毒主要经灰飞虱传播,可以在灰飞虱体内复制并经卵
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水稻条纹叶枯病毒(rice stripe virus, RSV)是单链负义编码的RNA病毒,它能引发水稻条纹叶枯病,导致水稻产量严重下降.这种病毒主要经灰飞虱传播,可以在灰飞虱体内复制并经卵传给下一代.所以,灰飞虱体内水稻条纹叶枯病毒的快速而准确的检测对水稻条纹叶枯病的预测和防治都具有重要的意义.在这里,我们采用RT-PCR的方法对单个传毒灰飞虱体内的水稻条纹叶枯病毒进行了检测.用位于水稻条纹叶枯病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶基因上的一对引物,我们从带毒灰飞虱和染病水稻叶上都特异性地得到了445bp的PCR产物.同时,在灰飞虱actin基因内含子和外显子相连处设计了一对引物,其PCR产物做为RNA特异的阳性对照,从而保证RT-PCR结构的准确性.我们还优化了双重RT-PCR的条件,即一次PCR反应得以同时检测水稻条纹叶枯病毒和灰飞虱actin基因的存在.我们的实验结果表明RT-PCR方法可以快速而准确地检测出灰飞虱带毒与否,从而得以对水稻条纹叶枯病的爆发进行早期监测.
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