RNA干扰抗乙型肝炎病毒的实验研究

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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA引起的保守的生物学反应,dsRNA经过RNA酶Ⅲ核酸酶(Dicer)处理后,降解成21~23个碱基的siRNA,siRNA与RNA诱导沉默复合物(RNA-induced silencingcomplex,RISC)结合后,siRNA解链,反义链引导RNA诱导沉默复合物与同源mRNA结合,从而切割mRNA,使之丧失转录信息,达到特异性抑制目的基因表达效果。在哺乳动物细胞中,RNAi被成功用于抑制内源性基因表达和各种病原体的复制。本研究中,分别以乙型肝炎病毒(HBV)C区与S区为靶位,构建表达siRNA的质粒载体pSilencer3.1-Hlhygro,体外观察C区或S区siRNA及C区联合S区siRNA抗HBV的效果。实验得出:(1)筛选出的靶向HBVC区与S区的siRNA能抑制HBV的复制和抗原表达。(2)siRNA抑制作用呈剂量依赖性和序列特异性。(3)siRNA抑制效果与靶位选择有关。(4)两不同靶位的siRNA共同转染,无协同作用。(5)siRNA干扰具有高度的专一性,不会影响其他基因的表达。
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