【摘 要】
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多糖是紫花苜蓿重要活性成分之一。本论文主要通过响应面试验来优化碱法提取苜蓿多糖的工艺条件,以DPPH清除率为指标,采用离子交换柱层析对碱法提取的苜蓿粗多糖进行纯化,并构建3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型来鉴定苜蓿多糖的降血糖活性组分。1.将紫花苜蓿进行粉碎,通过除色素、除蛋白等预处理后运用碱法提取苜蓿多糖。使用DPPH初步检测苜蓿多糖的抗氧化活性为80.6%,采用响应面试验对碱法提取苜蓿多糖的工
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多糖是紫花苜蓿重要活性成分之一。本论文主要通过响应面试验来优化碱法提取苜蓿多糖的工艺条件,以DPPH清除率为指标,采用离子交换柱层析对碱法提取的苜蓿粗多糖进行纯化,并构建3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型来鉴定苜蓿多糖的降血糖活性组分。1.将紫花苜蓿进行粉碎,通过除色素、除蛋白等预处理后运用碱法提取苜蓿多糖。使用DPPH初步检测苜蓿多糖的抗氧化活性为80.6%,采用响应面试验对碱法提取苜蓿多糖的工艺条件进行优化,通过响应面试验得到苜蓿多糖的最佳提取条件为提取温度81.3℃,提取时间为2.12h,酶含量为2.03%,碱浓度为10.11%,此条件下苜蓿多糖的得率为19.7%。2.通过DEAE-52离子交换柱层析对苜蓿多糖进行洗脱后得到3个组分,分别为APS-I、APS-II、APS-III,通过Sephadex G-100对APS-II洗脱后均得到单一组分的峰,表明其组分均较为单一。APS-II分子量为8736,单糖组成为木糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖和鼠李糖,摩尔比为0.279:0.351:0.305:0.031:0.031。3.使用3T3-L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗模型,对苜蓿多糖进行体外降血糖活性的检测,三个组分中APS-II抗氧化活性最高,为88.2%,且APS-II组分的降糖效果最好,与二甲双胍在0.4mg/m L浓度下降糖效果无显著差异。
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