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目的:牙周病是常见的和多发的一种口腔疾病,其常导致牙槽骨质吸收,牙周再生研究一直是中外对治疗牙周病方法的研究重点。本实验通过探讨我国中药丹参主要活性成分丹酚酸B(Salvianolic acid B,Sal B)对牙周再生种子细胞---人牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)成骨分化的影响,从而初步为丹酚酸B运用于临床牙周治疗提供理论基础。方法:1刮取年轻正畸牙牙周膜后运用组织块法,对人牙周膜细胞进行原代培养,鉴定后取第三代细胞进行实验。2细胞毒性实验。运用MTT法检测不同浓度丹酚酸B对人牙周膜细胞增殖活性影响。3成骨实验分组。实验分为对照组(Con组)、标准成骨诱导培养基组(OIM组)、标准成骨培养基+丹酚酸B组(OIM+Sal B组):其中丹酚酸B浓度分别为0.1μM、0.5μM、1μM、5μM。4人牙周膜细胞碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性测定。按实验分组培养7天后对hPDLCs进行ALP活性测定。5人牙周膜细胞ALP染色。按实验分组培养7天后对hPDLCs进行ALP染色。6矿化结节染色。按实验分组培养20天后运用茜素红染液对细胞进行染色。7 Real-time PCR检测骨钙素(osteocalcin,OCN)基因表达。按实验分组培养10天后,运用Real-time PCR检测人牙周膜细胞OCN mRNA表达。结果:1成功培养并鉴定人牙周膜细胞。2细胞毒性实验结果:在丹酚酸B浓度为0.1μM、0.5μM、1μM、5μM时其对人牙周膜细胞增殖活性无影响。3 ALP活性测定结果:当丹酚酸B浓度为0.5μM、1μM、5μM时均能增加人牙周膜细胞ALP活性,与OIM组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。4 ALP活性染色结果:OIM+Sal B(0.1μM、0.5μM、1μM、5μM)组胞质蓝染程度高于OIM组。5矿化结节染色结果:当丹酚酸B浓度为0.5μM、1μM、5μM时人牙周膜细胞形成矿化结节数量明显高于OIM组。6 Real-time PCR结果:当丹酚酸B浓度为0.5μM、1μM、5μM时均能增加OCN mRNA表达,与OIM组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:适宜浓度的丹酚酸B能有效促进人牙周膜细胞成骨分化。Sal B在牙周组织再生修复中具有广阔的应用前景和价值。