人血清白蛋白纳米管的制备及其对核酸吸附与释放性能的研究

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蛋白质纳米管是一类具备生物活性、生物相容性、易降解和易于修饰特性的纳米材料,在生物催化、分离和载药等领域有着独特的优势及广阔的应用前景。本文在蛋白质纳米管制备基础上讨论了人血清白蛋白(HSA)微/纳米管的制备及其影响因素;研究了HSA纳米管对核酸的吸附与释放。本文的主要研究成果如下:1.以人血清白蛋白(HSA)和聚乙烯亚胺(PEI)为组装材料,采用径迹刻蚀聚碳酸酯(PC)纳米多孔膜为模板,利用层层自组装(LbL assembly)技术制备了HSA微米管和纳米管。考察了HSA微米管和纳米管制备的影响因素,如溶液pH、离子强度、组装层数、沉淀清洗次数和模板孔径,并利用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、傅立叶变换红外光谱(FT-IR)和X射线能谱(EDS)表征其形态与组成。结果显示:当HSA和PEI溶液pH分别为7.4和10.3,且PEI溶液不加NaCl时,组装得到的管状结构较好;组装层数影响管壁厚度,组装层数越多管壁越厚,其中PEI/HSA双分子层数应不少于3;为使微/纳米管从PC模板中充分释放,N,N-二甲基甲酰胺(DMF)清洗沉淀次数应不少于5次;微/纳米管的外径取决于PC模板的孔径。2. 利用紫外光谱法研究了内外管壁均修饰聚阳离子电解质PEI的HSA纳米管(PEI/HSA)5PEI对DNA的吸附与释放。以polyA25为模型ssDNA,探讨了(PEI/HSA)5PEI纳米管吸附DNA的影响因素,并利用动力学和热力学模型分析了吸附过程。结果显示:(PEI/HSA)5PEI内米管对DNA有高效的吸附性能(Q0=606.0 mg/g);吸附过程符合准二级吸附动力学模型、颗粒内扩散模型和Langmuir模型;可知DNA在(PEI/HSA)5PEI纳米管上的吸附为单分子层吸附、(PEI/HSA)5PEI纳米管对DNA有较强的作用力(b<1)且吸附有利(RL<1)。研究了溶液离子强度对DNA释放的影响。结果显示:DNA释放率随溶液的离子强度增加而增大;离子强度相同,pH 5.7的平衡释放率高于pH 7.4,表明(PEI/HSA)5PEI纳米管对DNA的释放同时受pH影响。本研究对于了解DNA与蛋白质纳米管间的相互作用以及研究和发展蛋白质纳米管作为基因载体等具有十分重要的指导意义。
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