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断奶是仔猪出生后面临的最大应激反应,如何提高断奶仔猪生长性能和免疫功能、减少断奶应激一直是畜牧科技工作者关注和研究的热点。树突状细胞(Dendritic cells,DCs)是目前已知的体内功能最强的抗原递呈细胞,精氨酸(Arginine,Arg)是对提高仔猪生长性能、免疫功能以及促进DCs分化成熟具有重要作用。但目前尚未见有关仔猪断奶对DCs分化及其介导的肠道黏膜免疫功能的影响以及Arg对断奶仔猪DCs化及其介导的肠道黏膜免疫功能的调节作用的报道。本试验以仔猪为动物模型,以DCs为重点研究对象,研究断奶对DCs介导的断奶仔猪肠道黏膜免疫功能的影响及哺乳期补饲Arg对其的调节作用。试验一、断奶对树突状细胞介导的仔猪肠道黏膜免疫功能的影响本试验选取21日龄体重相近的健康杜×长×大仔猪40头,公母各半,随机分为两个组,每组20头,分别为哺乳组(S组)和断奶组(W组)。S组仔猪21日龄不断奶,继续哺乳,W组仔猪21日龄断奶,饲喂常规仔猪日粮。分别于断奶后3d和断奶后7d每组随机选取8头仔猪,屠宰取样。测定生长性能、肠道形态、T细胞数量、DCs数量、免疫指标、Notch2信号通路关键基因的表达。结果表明:(1)与S组相比,断奶后3d和7d,W组仔猪体重均极显著降低(P<0.01);断奶后3d,W组仔猪血清中LDH含量显著升高(P<0.05),W组空肠和回肠绒毛高度和绒毛表面积显著降低(P<0.05)、隐窝深度显著提高(P<0.05)、V/C显著降低(P<0.05);断奶后7d,W组空肠绒毛高度、绒毛宽度、绒毛表面积极显著降低(P<0.01)。(2)与S组相比,断奶后3d,W组血液中CD3+T细胞数量显著降低(P<0.05),胸腺和脾脏中CD3+T细胞数量显著提高(P<0.05)、CD3+CD4+/CD3+CD8+T细胞比值显著降低(P<0.05),胸腺中CD3+CD4+T细胞数量显著降低(P<0.05)。(3)与 S 组相比,断奶后 3d,W 组 CD111b+CD16+、SWC3a+CD86+、SWC3a+SLA-Ⅱ-DR+DCs 数量显著减少(P<0.05)。(4)与S组相比,断奶后3d,W组血清中IL-2含量极显著提高(P<0.01),空肠黏膜中sIgA、IL-2和IL-10含量显著降低(P<0.05)、IL-1β含量显著提高(P<0.05),回肠黏膜中IL-2含量和IL-2、IL-4基因表达量显著提高(P<0.05)、IL-10含量显著降低(P<0.05);断奶后7天,空肠黏膜中IL-2含量和IL-12、IFN-y基因表达量显著提高(P<0.05)、IL-10含量和IL-4基因表达量均显著降低(P<0.05),回肠黏膜中IL-Iβ极显著降低(P<0.01)、IL-2和IFN-y基因表达量显著均提高(P<0.05)。(5)与S组相比,断奶后3天,W组回肠黏膜中Jagged1基因表达量极显著降低(P<0.01);断奶后7天,W组空肠黏膜中Notch2和Jagged1基因表达量均显著降低(P<0.05),回肠黏膜中D111基因表达量显著降低(P<0.05)。由此可见,断奶后仔猪肠道结构受损,肠道黏膜促炎细胞因子分泌增加,免疫球蛋白和抗炎细胞因子分泌降低,T淋巴细胞亚群失衡,DCs分化成熟受到抑制,断奶后3天免疫应激大于断奶后7天。断奶后仔猪肠道黏膜Notch2信号通路基因表达受到抑制,仔猪断奶应激导致的肠道黏膜免疫功能损伤和DCs的分化减少可能与Notch2通路有关。试验二、精氨酸对树突状细胞介导的断奶仔猪肠道黏膜免疫功能的调节作用本试验选取7日龄体重相近的健康杜×长×大哺乳仔猪40头,公母各半,每组20头,分为对照组(C组)和精氨酸组(A组)。7日龄起,在自然哺乳的同时,C组每日灌服0.9%生理盐水40mL,A组每日灌服补饲Arg40mL(250mg/kg/d)。21日龄断奶,饲喂常规配合饲料。分别在断奶当天(21d)和断奶后3d(24d)每组随机挑选8头仔猪,屠宰采样。测定生长性能、肠道形态、T细胞数量、DCs数量、免疫指标、Notch2信号通路关键基因的表达量。结果表明:(1)哺乳期补饲Arg,可显著提高断奶时和断奶后3d体重和ADG(P<0.05),显著提高断奶时脾脏指数、血清和回肠黏膜中NO、NOS含量(P<0.05),显著提高断奶后3d仔猪空肠回肠黏膜中LDH活性和NOS含量、回肠黏膜中NO含量(P<0.05)。哺乳期补饲Arg,断奶时可显著提高空肠绒毛高度和V/C、回肠V/C和绒毛表面积(P<0.05),极显著降低回肠隐窝深度(P<0.01);断奶后3d,显著提高仔猪空肠绒毛高度、V/C和绒毛表面积(P<0.05)。(2)哺乳期补饲Arg,可显著提高断奶时胸腺和脾脏中胸腺中CD3+CD4+/CD3+CD8+T细胞比值(P<0.05),显著提高断奶后3d胸腺中CD3+CD4+T细胞和脾脏中CD3+CD8+T细胞数量(P<0.05)。(3)哺乳期补饲Arg,可显著提高断奶时回肠 CD11b+CD16+、SWC3a+CD1a+、SWC3a+CD86+、SWC3a+SLA-Ⅱ-DR+DCs数量(P<0.05)。(4)哺乳期补饲Arg,断奶时可显著提高血清中IgG含量、空肠回肠黏膜中sIgA和IL-10含量(P<0.05)、显著降低血清IFN-γ含量、空肠黏膜中IL-11β、TNF-α基因表达量、回肠黏膜中IL-2、IL-12含量和IL-2、IFN-γ基因表达量(P<0.05);断奶后3d,可显著提高空肠黏膜中sIgA含量和回肠黏膜中sIgA、IL-10含量、IL-10基因表达量(P<0.05),显著降低空肠黏膜中IFN-γ含量和IL-12基因表达量、回肠黏膜中IL-1β含量和IL-1β、IL-12基因表达量(P<0.05)。(5)哺乳期补饲Arg,可显著提高断奶时空肠黏膜中Notch2基因表达量、回肠黏膜中D111和Jagged1基因表达量(P<0.05),显著提高断奶后3d空肠黏膜中D111和Hes1基因表达量、回肠黏膜中Notch2基因表达量(P<0.05)。由此可见,哺乳期补饲Arg可提高仔猪生长性能,减少断奶失重,可通过减少促炎细胞因子分泌,增加抗炎细胞因子和免疫球蛋白分泌来减少断奶造成的免疫应激,并且可以促进断奶仔猪T淋巴细胞和DCs的分化。哺乳期补饲Arg可促进Notch2信号通路关键基因的表达,Arg对断奶仔猪T淋巴细胞和DCs的分化的调节作用可能与Notch2信号通路有关。综上,断奶会导致仔猪肠道结构和黏膜免疫功能受损,T淋巴细胞亚群失衡,成熟DCs数量减少,Notch2信号通路基因表达受到抑制,且仔猪断奶后3天断奶导致的免疫应激更为严重。哺乳期补饲Arg可提高仔猪生长性能,减少断奶失重,提高断奶仔猪肠道黏膜免疫功能,促进断奶仔猪T淋巴细胞和DCs的分化。促进Notch2信号通路关键基因的表达,Arg对断奶仔猪T淋巴细胞和DCs的分化的调节作用可能与Notch2信号通路有关。