安胎丸为古代经典方剂,最早来源于《金匮要略》当归散一方。是由当归、制川芎、黄芩、炒白芍及白术五味药材加工制成的中药复方制剂,有安胎之功效,用于妊娠血虚,胎动不安,面色淡黄,不思饮食,神疲乏力等病症。现收载于卫生部药品标准《中药成方制剂》第一册。现有安胎丸的质量评价,标准及文献报道了显微鉴别、薄层色谱鉴别及几个指标性成分的定量测定。中药及其复方具有多组分、多靶点、整体调节的特点,现有质量评价方法难以控制安胎丸的整体质量。本研究以血清药物化学作为中药物质基础的研究方法,采用指纹图谱技术结合多指标成分定量分析对安胎丸的内在质量进行研究,可为安胎丸的整体质量控制提供依据。研究内容如下:一、基于UPLC-Q-TOF-MS技术的安胎丸化学成分研究采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)快速鉴定安胎丸的化学成分。色谱柱为Agilent Eclipse Plus-C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源,正、负离子模式下采集数据。从安胎丸中共鉴定出59个化学成分,包括5个酚酸类成分、6个单萜苷类成分、29个黄酮类成分、14个苯酞类成分、2个苯乙醇苷类成分及3个倍半萜内酯类成分,并对其裂解规律进行解析。该研究为安胎丸的质量控制和体内代谢研究奠定了基础。二、安胎丸UPLC指纹图谱及模式识别研究建立安胎丸的超高效液相指纹图谱分析方法,为评价其质量提供依据。采用UPLC法,色谱柱为Agilent SB-C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L·min-1;0~2 min检测波长为280 nm,2~8 min检测波长为230 nm,8~9.4 min检测波长为316 nm,9.4~35 min检测波长为280 nm;柱温35℃;进样量2μL。通过相似度评价,结合聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)对12批次安胎丸指纹图谱进行质量评价。标定了安胎丸UPLC指纹图谱的24个共有峰,指认了9个成分:芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、洋川芎内酯A、白术内酯I;12批样品相似度均在0.9以上。通过主成分分析、聚类分析及正交偏最小二乘判别分析,12批样品聚成3类,并发现阿魏酸、黄芩素等差异较大的5个成分。该法快速、高效、可靠,是安胎丸质量控制的有效手段。三、UPLC同时测定安胎丸中8种成分的含量建立同时测定安胎丸中8种成分(芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、洋川芎内酯A、白术内酯I)含量的超高效液相色谱(UPLC)方法。采用Agilent SB-C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱;以乙腈-0.4%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.3 m L·min-1;0~2 min检测波长为280 nm,2~8 min检测波长为230 nm,8~9.4 min检测波长为316 nm,9.4~35 min检测波长为280 nm;柱温35℃;进样量2μL。8个成分的峰面积与浓度的线性关系良好(r2≥0.9980);回收率在98.0%~103.8%范围内。该方法快速、准确、灵敏度高、重复性好,可用于安胎丸的质量控制。四、基于UPLC-Q-TOF-MS技术的安胎丸血中移行成分研究采用UPLC-Q-TOF-MS技术分析安胎丸血中移行成分,以确定安胎丸体内直接作用物质。色谱柱为Agilent Eclipse Plus-C18(50 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,电喷雾离子源,正、负离子模式下采集数据。结果在给药大鼠的血浆样品中鉴别出44个血中移行成分,其中有28种原型成分和16个代谢产物,并对其可能的代谢途径进行分析。该法能较全面地分析安胎丸的代谢成分,为安胎丸物质基础研究提供依据。