论文部分内容阅读
辣木(Moringa oleifera)原产印度及非洲,为多用途的经济树种,辣木属单科单属植物,是多年生常绿乔木或多年生热带落叶乔木。人们开发和利用辣木作为营养食物、药物及其它功能原料,现在已广泛分布于非洲、亚洲和中美洲的30多个热带、亚热带国家或地区,有良好的开发利用前景。近年来其栽培面积在我国不断扩大,然而因栽培技术落后、管理粗放加上气候影响等,辣木栽培过程中深受病虫害威胁,目前已报道病害中主要有半裸镰刀菌(Fusarium semitectum)和黑星菌(Fusicladium pallidorseum)侵染果荚和茎部。辣木枝枯病、辣木叶斑病是2015年11月在海南省昌江辣木种植基地被发现,目前尚未见报道。本试验对该两种病害进行病原菌鉴定、生物学特性测定、化学药剂筛选,并用绿色荧光蛋白(GFP)标记辣木叶斑病菌,目的是为这两种病害进行早期诊断、预测预报及田间防治提供理论基础。主要研究结果:1.明确鉴定了辣木上两种新病害:采用组织分离法、柯赫氏法则验证、形态学特征观察和rDNA-ITS序列分析等方法,鉴定了辣木枝枯病病原为木贼镰刀菌(Fusariumequiseti)、辣木叶斑病病原为多主棒孢(Carynespora cassicola)。2.生物学特性:木贼镰刀菌(F.equiseti)生长适宜温度25~30℃,最适温度28℃;适宜pH 6~8,最适pH为7;在PDA和PSA培养基上菌丝生长最快且密集,最适合该菌生长;光照对该菌菌丝生长影响不大,无显著差异;以蔗糖为碳源时利用率最高,菌丝生长最快;以牛肉浸膏为氮源时利用率最高,菌丝生长最快;致死温度为65℃,10min。多主棒孢(C.cassiicola)的生长适宜pH6~8,最适pH为7;在PDA培养基上生长,最适合该菌生长;以蔗糖和木糖的碳源时菌丝生长较快;以牛肉浸膏和蛋白胨为氮源时菌丝生长较快;光照对该菌菌丝生长影响不大,无显著差异;适宜温度25~30℃,最适温度28℃;致死温度为60℃,10min。3. GFP标记了C.cassiicola:将C.cassiicola通过PEG介导原生质体转化的方法,获得在菌丝、分生孢子稳定发出绿色荧光的转化子,将所得转化子的形态特征与野生菌相比,生长速度比野生菌慢,菌落形态无明显差异,致病性测定与野生菌相比致病能力未减弱。4.药剂筛选:选用10种药剂,分别测定对两种病原菌的毒力。对F.equiseti,毒力最强的杀菌剂是丙环唑,EC50最小为0.167μg/mL、EC90为3.951μg/mL,氟硅唑、咪鲜胺、戊唑醇、腈菌唑、苯醚甲环唑EC50分别为0.39、1.409、1.411、7.271、8.561μg/mL,对Fequiseti的抑制效果相对较好;代森锰锌、甲基硫菌灵和百菌清,EC50分别为18.921、32.594、76.764 μg/mL抑制效果相对较差;异菌脲的EC50为90.59 μg/mL毒力最弱。对 C.cassiicola 氟硅唑的 EC50为 0.184 μg/mL,EC90为 160.4 μg/mL,甲基硫菌灵的EC50为3.335 μg/mL,EC90为50.808 μg/mL,从EC50和EC90综合考虑结果是甲基硫菌灵的毒力最高,氟硅唑次之,以及丙环唑、咪鲜胺、戊唑醇和代森锰锌EC50 分别为 6.382、8.154、13.649、26.716 μg/mL 对 C cassiicola 的抑制效果相对较好;腈菌唑、异菌脲、苯醚甲环唑则抑制效果相对较差,EC50分别为30.852、31.13、36.181 μg/mL;百菌清EC50为269.497 μg/mL毒力最弱,抑菌效果最差。