丹参注射液对骨折愈合过程中BMP-7、TGF-β1及bFGF表达的影响

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背景:近年来随着对骨折愈合的分子生物学研究的深入,各种生长因子在骨折愈合中的作用已成为各国学者的研究热点之一。其中BMP-7、TGF-β1、bFGF在骨折愈合中的作用已较为肯定。丹参是中医活血化瘀的代表性药物,具有广泛的药理作用。近年来不少学者对丹参治疗骨折的作用机理作了深入研究,取得了可喜的进展,但其对骨折愈合过程中BMP-7、TGF-β1及bFGF表达的影响及其作用机制尚不明确。目的:通过制备兔骨折动物模型、再经丹参注射液治疗后,采用免疫组化和ELISA方法测定BMP-7、TGF-β1、bFGF水平变化,再结合HE染色及X线影像观察,探讨丹参促进骨折愈合在分子水平的作用机制,为丹参注射液临床治疗骨折提供现代分子生物学基础。方法:选取72只新西兰大白兔,随机分为实验组和对照组,每组36只,制作左前臂桡骨骨折模型。实验组肌注丹参注射液2ml/d,对照组注射生理盐水2ml/d,至术后28天。两组分别于术后第1、2、3、4、6、8周各选取6只大白兔,摄X线片观察骨折愈合情况;采用ELISA检测其血清BMP-7、TGF-β1和bFGF浓度;处死后取以骨折处为中心的4mm组织标本,HE染色和免疫组织化学方法检测BMP-7、TGF-β1和bFGF在局部组织中表达。两组比较,采用两个样本均数比较的t检验,利用SPSS18.0软件进行统计。结果:(1)术后于各时相点摄X线片,第3,4周实验组与对照组比较,骨痂生成量增加,且达到骨性愈合的时间较早。(2)第3,4周HE染色切片提示实验组骨痂形成增多,成骨细胞和破骨细胞数量均较对照组多。(3)术后3周BMP-7免疫组化平均光密度值两组之间的差异有统计学意义;2周bFGF免疫组化平均光密度值两组之间的差异有统计学意义;3周TGF-β1免疫组化平均光密度值两组之间的差异有统计学意义。(4)ELISA法检测术后4周BMP-7血清含量两组之间的差异有统计学意义;2周bFGF血清含量两组之间的差异有统计学意义;3周TGF-β1血清含量两组之间的差异有统计学意义。结论:丹参注射液能促进骨折愈合过程中BMP-7、TGF-β1及bFGF等生长因子的表达。这可能是丹参注射液能促进骨折愈合的机理之一。
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