B7反义硫代寡核苷酸设计、合成、以及对大鼠同种异体心脏移植的影响

来源 :汕头大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangbaosen321
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目的 探索应用B7反义寡核苷酸阻断共刺激信号诱导移植免疫耐受的可行性。本试验根据反义寡核苷酸的设计原理,设计并合成针对不同片段的B7反义寡核苷酸,通过同种大鼠异位心脏移植模型,在基因水平阻断受体大鼠B7分子的mRNA的表达,观察其对移植心脏成活时间的影响。 方法 根据反义寡核苷酸的设计原理和要求,设计、合成、纯化针对B7分子起始区域、终止区域、含GGGA片段区域的硫代反义寡核苷酸,单链长20碱基,另合成随机对照序列。建立大鼠异位心脏移植漠型,将其作为免疫抑制剂输入大鼠体内,观察移植心脏的成活时间,并与使用环孢霉素A组作对照组研究。 结果:1、成功建立大鼠的异位心脏移植模型。2、成功设计分别 针对B7WA的起始区域、终止区域、含MA片段区域的反义寡 核昔酸。3、DNA合成仪上合成硫代寡核昔酸,并用聚丙烯酚胺凝胶 电泳(PAGE)纯化,量与纯度达到要求*、动物试验表明,针对B7MA 的起始区域、终止区域的反义寡核茸酸无明显疗效。针对含GGGA片 段区域的反义寡核苦酸有效,但较环抱霉素为弱。 结论:l、大鼠的异位心脏移植模型稳定可靠,操作简便。2、针对含 GGGA片段区域的反义寡核昔酸抗排斥反应有效,移植大鼠心脏成活 时间明显延长。表明反义寡核昔酸可以在I7llrtrvA水平阻断B7的表达, 本试验开创了在基因水平阻断共刺激信号,诱导移植免疫耐受的新途·径。
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