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第一部分国产异氟醚(宁芬)对成年大鼠行为学的影响
目的：通过Morris水迷宫实验，观察成年雄性SD大鼠持续吸入国产异氟醚(宁芬)30min后的行为学变化，探讨国产异氟醚是否与术后认知功能障碍(POCD)的发生有关。
方法：(1)成年雄性SD大鼠36只(N=6×6组)，随机分为空白对照组(A组，即空气组)、阳性对照组(O2组，即氧气组)、麻醉组(T1、T2、T3、T4四个亚组，即异氟醚吸入30min苏醒后2h、1d、7d、14d组)。(2)异氟醚吸入前所有大鼠进行Morris水迷宫定位航行适应性训练5d，记录逃避潜伏期和总路程(即大鼠从入水到爬上平台所需的时间和运行路程)；第6d行空间搜索实验，记录大鼠120s内在平台象限停留时间、平台象限停留路程占总路程百分比、平均速度及经过平台次数。训练结束后，A组不进行任何处理，O2组吸入纯氧30min后与A组再次行水迷宫实验，观察指标同适应性训练；T1、T2、T3、T4组吸入2.0％浓度国产异氟醚(宁芬)30min，记录大鼠麻醉前、麻醉30min、麻醉完全苏醒后的呼吸次数，待各组麻醉苏醒后2h、1d、7d、14d再次行水迷宫实验，观察指标同适应性训练。
结果：(1)大鼠麻醉前、麻醉30min、麻醉完全苏醒后的呼吸次数(次/min)分别为83.0±7.1、63.3±10.4、83.8±5.0，麻醉30min呼吸次数明显减少，差异有统计学意义(P<0.01)。(2)异氟醚吸入前5d水迷宫定位航行适应性训练结果分别为：①逃避潜伏期(s)为53.5±41.7、28.4±30.8、18.4±16.5、16.7±18.2、13.0±10.5；②总路程(cm)为1291.3±983.9、809.5±934.6、469.0±401.1、444.4±499.7、379.9±321.1。(3)异氟醚吸入前第6d各组空间搜索适应性训练结果为：①平台象限停留时间(s)为50.0±10.3、41.0±10.5、48.6±12.7、48.6±12.9、47.6±10.3、50.1±8.0；②平台象限停留路程占总路程百分比(％)为35.5±5.7、28.0±6.8、38.6±5.4、32.4±9.5、33.6±4.9、37.5±4.7；③平均速度(cm/s)为19.5±5.8、23.4±3.7、23.8±1.9、23.2±3.6、24.2±3.4、25.3±1.9；④经过平台次数(次)为1.7±1.0、1.8±1.7、2.8±2.0、2.2±1.6、1.7±1.2、2.8±1.9。与第1d比较，第2、3、4、5d逃避潜伏期、总路程结果差异有统计学意义(P<0.01)，且随着天数的增加逐渐缩短。与O2组比较，T1和T4组平台象限停留路程占总路程百分比差异有统计学意义(P<0.05)。(4)异氟醚吸入后Morris水迷宫实验结果分别为：①逃避潜伏期(s)为11.2±6.6、11.0±9.6、12.0±14.5、24.8±22.2、14.8±23.6、14.0±13.0；②总路程(cm)为347.5±252.3、342.0±256.1、523.7±1044.8、608.5±457.1、372.0±606.9、461.5±346.9；③平台象限停留时间(s)为53.1±5.5、46.8±6.5、47.4±11.6、45.3±10.0、41.2±6.3、38.9±6.0；④平台象限停留路程占总路程百分比(％)为40.0±5.2、35.2±4.5、34.8±6.8、37.7±12.6、32.0±3.7、31.1±4.4；⑤平均速度(cm/s)为26.5±2.2、30.2±2.1、26.2±3.0、21.7±1.3、26.3±1.7、23.6±2.4；⑥经过平台次数(次)为2.3±1.5、1.8±1.3、2.2±1.0、1.5±1.0、2.3±1.8、1.7±1.0。与A、O2组比较，T2组逃避潜伏期明显延长(P<0.01)，与T1、T3、T4组比较，T2组逃避潜伏期延长(P<0.05)，其余各组差异无统计学意义(P>0.05)。T2组平均速度明显低于A、O2、T1、T3组(P<0.01)。
结论：大鼠吸入国产异氟醚(宁芬)30min后，1d内对学习记忆有一定程度影响，1d后学习记忆逐渐改善，自行恢复到麻醉前水平，提示国产异氟醚(宁芬)的使用可能与术后短期POCD的发生有一定关系，这种变化是可逆的，不会造成长期的学习记忆损害。
第二部分国产异氟醚(宁芬)对成年大鼠S100、Tau、Aβ的影响
目的：通过测定经Morris水迷宫训练的成年大鼠吸入国产异氟醚(宁芬)后血浆S100、海马Tau、Aβ的变化，进一步探讨异氟醚与术后认知功能障碍(POCD)的关系。
方法：将第一部分实验的各组大鼠随机分为两个亚组，(每组N=3，共6组)，其中任意一个亚组，待麻醉苏醒行水迷宫训练后将大鼠以1％戊巴比妥钠(4mg/100g)腹腔注射麻醉，取眼眶血2～4ml置于肝素管内，6℃下3000r/min离心15min取上清液，酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测血浆S100蛋白含量。另一亚组大鼠开胸，以4％多聚甲醛经主动脉行脑灌注后断头，取脑组织，石蜡包埋、切片，免疫组化染色测定海马Tau、Aβ的表达。
结果：(1)S100蛋白(pg/ml)检测结果分别为：211.5±105.4、197.2±81.9、142.6±42.4、329.1±73.4、214.6±90.2、158.6±45.1。T2组S100蛋白含量高于A、T3组(P<0.05)，明显高于O2、T1、T4组(P<0.01)。(2)CA1区Tau蛋白平均光密度分别为：0.189±0.024、0.194±0.023、0.207±0.020、0.210±0.031、0.195±0.022、0.193±0.018；CA3区Tau蛋白平均光密度分别为：0.206±0.011、0.203±0.023、0.214±0.021、0.217±0.014、0.208±0.010、0.218±0.016。T2组与A组比较，海马CA1区Tau蛋白阳性反应平均光密度增加(P<0.05)；CA3区Tau蛋白阳性反应平均光密度各组间差异无统计学意义(P>0.05)。(3)CA1区Aβ蛋白平均光密度分别为：0.147±0.013、0.151±0.002、0.147±0.005、0.147±0.005、0.147±0.011、0.150±0.004；CA3区Aβ蛋白平均光密度分别为：0.145±0.011、0.148±0.005、0.158±0.005、0.149±0.006、0.150±0.011、0.149±0.006。T1组与A、T2组比较，CA3区Aβ蛋白阳性反应平均光密度增加(P<0.05)；与T4、O2组比较明显增加(P<0.01)。
结论：吸入异氟醚苏醒后短期(2h～1d内)，大鼠血浆S100和海马Tau、Aβ含量增加，7～14d后自行恢复至正常水平，其恢复时间与第一部分行为学结果基本一致。说明大鼠吸入异氟醚后导致短期学习记忆改变可能与S100、Tau、Aβ改变有关，由此推测可以通过检测S100、Tau、Aβ来判断学习记忆改变及其变化程度。