【摘 要】
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目的:筛选菘蓝抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的有效部位.从有效部位中进一步提纯并筛选有效化学单体,同时利用HSV-1的致病模型评价4种有效部位对感染HSV-1小白鼠的保护作用,从而
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目的:筛选菘蓝抗单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)的有效部位.从有效部位中进一步提纯并筛选有效化学单体,同时利用HSV-1的致病模型评价4种有效部位对感染HSV-1小白鼠的保护作用,从而为单纯疱疹病毒感染的治疗提供新的手段.方法:该实验分三个阶段.第一阶段为有效部位的筛选.在微量培养板上,通过观察细胞病变效应(CPE)和噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性以比较不同部位抗HSV-1的作用,并确定抗病毒的治疗指数(TI)较高的部位为有效部位.然后从其中4种有效部位中提纯12种化学单体,并进一步研究其体外抗HSV-1的活性.第二阶段,通过观察CPE、MTT比色法检测细胞活性、PCR检测病毒核酸、病毒滴度滴定以确定12种化学单体中有抗HSV-1活性的化学单体.第三阶段,通过体外抗病毒活性测定,选择4种有效部位的两个无毒剂量(0.08g·kg<-1>·d、0.32 g·kg<-1>·d)对感染HSV-1小白鼠进行治疗,疗程5天.通过观察小鼠生存率和平均生存天数来评价4种有效部位对感染HSV-1小白鼠的保护作用.结论:1、菘蓝体外抗HSV-1的有效部位为1号、2号、4号、5号、7号、8号、9号、11号和12号部位,它们的提取工艺可作进一步提取有效单体用;2、菘蓝在体外通过抑制生物合成和直接杀灭病毒两种途径发挥抗HSV-1作用;3、从菘蓝中提取的化学单体F3、F8和F12有体外抑制HSV-1生物合成的作用,菘蓝中的抗病毒活性物质可能为氨基酸类和嘌呤核苷酸类;4、菘蓝4号部位在于0.32 g·kg<-1>·d时对感染HSV-1小白鼠有保护作用,能提高生存率和延长生存时间.
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