核受体Nur77,也称为TR3或NGFI-B,是NR4A1编码的立早基因产物,在细胞增殖、分化、代谢、凋亡以及自噬等生物学进程中发挥重要作用。临床研究表明,Nur77在很多的癌症组织中高表达,如胰腺癌,结肠癌,膀胱癌等,这也预示着Nur77可能的促增殖功能;同时,Nur77还能够通过出核定位线粒体并引起细胞色素C释放的机制诱导肿瘤细胞的凋亡。Nur77在肿瘤细胞中的特殊功能使其成为肿瘤药物开发中一个潜在的靶点。mTOR属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员,在哺乳动物细胞中广泛存在。研究表明,mTOR信号通路的过度激活与众多癌症进程密切相关,如乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等。本课题旨在筛选以Nur77为靶点的抗肿瘤先导化合物,并对其机制进行探究。首先,我们从大量化合物中筛选得到三种对胃癌细胞有很好的杀伤作用且结构类似的吲哚类衍生物7n、7s、7w,生物学功能研究发现它们能够抑制胃癌细胞增殖并促进胃癌细胞凋亡。接着,通过对化合物的抗肿瘤机制研究发现,化合物7s一方面能够诱导Nur77的表达,出核以及线粒体定位进而启动细胞凋亡;另一方面,化合物7s还能够抑制对细胞生存非常重要的mTOR信号通路的激活。有趣的是,本论文还发现化合物7s对mTOR信号通路的抑制作用依赖于核受体Nur77的表达。最后,我们通过体外纯化Nur77的配体结合域(LBD)蛋白,并进行等温热量滴定(ITC)和荧光滴定实验,证明化合物7s能够与Nur77的LBD区结合。因此,本论文通过对吲哚杂环系列化合物的筛选,发现化合物7s能够靶向Nur77发挥抗肿瘤作用。通过机制的初步探讨,发现化合物7s一方面通过Nur77的出核和线粒体定位介导细胞凋亡,另一方面通过Nur77依赖的方式抑制与细胞生存相关的mTOR信号通路的激活。