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目的:
评价血清半乳甘露聚糖(GM)检测对侵袭性曲霉病(IA)的诊断价值。
方法:
①动物实验:清洁级健康成年SD大鼠90只,雌雄各半按随机区组设计分为烟曲霉感染组、白假丝酵母菌感染组、毛霉感染组、肺炎链球菌感染组、烟曲霉口咽定植组,每组18只,再随机分为第3天、第7天和第12天3组采血,通过气管插管分别滴入相应的病原菌混悬液建立大鼠侵袭性肺部真菌感染和链球菌感染动物模型。经鼻腔和口咽滴入法建立烟曲霉口咽定植动物模型。分别于接种完成后第3天、第7天、第12天处死大鼠,取各组大鼠心脏血离心后备测GM,并取肺组织标本进行HE、PAM染色观察肺组织病理改变和查找真菌菌丝或孢子。
②临床研究:南京军区南京总医院住院病人49例,平均年龄55岁,男性34例,女性15例。包括IA组11例,其他IFI组20例和曲霉口咽定植组18例,分别取静脉血标本检测GM,其中IA组有6例于治疗后7d重复取血。
③标本检测:应用双夹心ELISA法检测实验大鼠和病人的血清GM,GM含量以Ⅰ值表示。
结果:
①动物模型肺组织病理学检查:除曲霉口咽定植组大鼠外,各组大鼠肺组织光镜下均见明显炎症反应,真菌感染(包括曲霉、白假丝酵母菌、毛霉感染)大鼠在肺组织中见真菌菌丝或孢子,而肺炎链球菌感染大鼠未见病原菌,曲霉口咽定植组大鼠肺组织未见明显炎症反应和其它异常的病理改变。
②大鼠血清GM值检测结果:烟曲霉感染组、白假丝酵母菌感染组、毛霉感染组、肺炎链球菌感染组和烟曲霉口咽定植组大鼠血清GM均值分别为1.689±0.294、0.892±0.463、0.873±0.394、0.771±0.339和0.903±0.488,烟曲霉感染组与其他四组分别比较P<0.05,白假丝酵母菌感染组、毛霉感染组、肺炎链球菌感染组和烟曲霉口咽定植组之间两两比较P>0.05。烟曲霉感染组第3天、第7天、第12天血清检测GM值分别为1.505±0.231、1.681±0.321和1.925±0.187,三个时间点之间比较P>0.05。以Ⅰ值为1.5作为诊断阈值诊断IA的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为78.6%、87.5%、57.9%和94.9%;接种完成后第3天、第7天和第12天血清GM检测以Ⅰ值为1.5时诊断IA的敏感性分别为60%、80%和100%,特异性分别为95.5%、81%和85.7%。
③临床研究血清GM检测结果:IA组病人血清GM值为1.628±0.290,其他IFI组和曲霉口咽定植组分别为0.963±0.487和0.832±0.430,IA组与其余二组比较P<0.05,其他IFI组与曲霉口咽定植组之间比较P>0.05。6例IA病人治疗前后GM值分别为1.668±0.236和1.616±0.277,两者比较P>0.05。以Ⅰ值为1.5作为诊断阈值诊断IA的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为72.7%、84.2%、57.1%和94.1%。
结论:
①GM检测能区分曲霉感染与白假丝酵母菌感染、毛霉感染和肺炎链球菌感染;
②GM检测能区分IA和曲霉口咽定植;
③GM可早期诊断IA;
④GM检测诊断IA的敏感性随感染时间的延长而增加:
⑤以Ⅰ为1.5作为诊断阈值诊断IA的敏感性、特异性较理想。