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目的本研究筛选建立理想而稳定的肾阳虚型变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)病证结合动物模型,然后在方药与证型相应、方药与证型不相应的情况下,比较小青龙汤和麻黄细辛附子汤干预AR两种不同证候模型的疗效差异,探讨其效应机制是否通过调节Thl/Th2细胞平衡来发挥作用。方法在卵清蛋白致敏AR豚鼠模型基础上,采用糖皮质激素、羟基脲、腺嘌呤三种不同阳虚诱导剂诱发,建立AR肾阳虚复合模型,观察动物生存状态及死亡情况、局部过敏症状,ELISA法测血清中sIgE和组胺含量,HE染色观察肾和睾丸组织形态学改变,比较三种模型的差异,从中筛选出理想而稳定的肾阳虚复合模型。然后同时建立两种不同的AR动物模型,即单纯模型和肾阳虚复合模型,分别给予小青龙汤和麻黄细辛附子汤进行交叉干预,观察各组动物的生存状态、局部过敏症状,ELISA法检测血清IFN-γ、IL-4浓度,实时荧光定量PCR法检测脾组织IFN-γmRNA、IL-4mRNA、T-betmRNA、 GATA-3mRNA表达水平,比较小青龙汤对单纯模型和肾阳虚复合模型的作用差异、麻黄细辛附子汤对单纯模型和肾阳虚复合模型的作用差异。结果1.糖皮质激素、羟基脲和腺嘌呤三种肾阳虚诱导剂均可使动物表现出肾阳虚症状、体重下降并具有一定的致死率。与空白对照组相比,糖皮质激素对肾脏和睾丸组织形态影响较小,羟基脲和腺嘌呤对肾脏和睾丸的形态结构影响较大。2.与空白对照组相比,单纯模型的生存状态无明显变化,出现明显的局部过敏症状；肾阳虚复合模型出现明显肾阳虚症状和局部过敏症状。两种模型均出现IFN-γ表达降低,IL-4表达升高,因而IFN-γ/IL-4比值降低；IL-2表达水平无变化；IL-10表达升高；IFN-γmRNA表达降低,IL-4mRNA表达升高,因而IFN-γmRNA/IL-4mRNA比值降低；T-betmRNA表达降低,GATA-3mRNA表达水平升高,因而T-betmRNA/GATA-3mRNA比值降低。且两种模型之间存在统计学差异,单纯模型组的总体变化幅度比肾阳虚复合模型组更显著。3.小青龙汤和麻黄细辛附子汤对两种模型都有影响作用。①小青龙汤对单纯模型的作用：改善局部过敏症状；使IFN-γ表达升高,IL-4表达降低,因而IFN-y/IL-4的比值升高：使IFN-ymRNA表达升高,IL-4mRNA表达降低,因而IFN-γmRNA/IL-4mRNA比值升高；使T-betmRNA表达升高,GATA-3mRNA表达降低,因而T-betmRNA/GATA-3mRNA比值升高。②小青龙汤对肾阳虚复合模型的作用：对生存状态和局部过敏症状无改善作用；对IFN-y表达无明显影响,使IL-4表达降低,因而IFN-y/IL-4的比值升高：使IFN-ymRNA表达升高,IL-4mRNA表达降低,因而IFN-ymRNA/IL-4mRNA比值升高；对T-betmRNA表达无明显影响,可使GATA-3mRNA表达降低,因而T-betmRNA/GATA-3mRNA比值升高。③麻黄细辛附子汤对单纯模型的作用：改善局部过敏症状；使IFN-γ表达升高,IL-4表达降低,因而IFN-y/IL-4的比值升高；对IFN-ymRNA表达无明显影响,使IL-4mRNA表达降低,因而IFN-ymRNA/IL-4mRNA比值升高；使T-betmRNA表达升高,对GATA-3mRNA表达无明显影响,因而T-betmRNA/GATA-3mRNA比值升高。④麻黄细辛附子汤对肾阳虚复合的模型的作用：改善生存状态和局部过敏症状；使IFN-γ表达升高,IL-4表达降低,因而IFN-γ/IL-4的比值升高；使IFN-γmRNA表达升高,IL-4mRNA表达降低,因而IFN-γmRNA/IL-4mRNA比值升高；使T-betmRNA表达升高,GATA-3mRNA表达降低,因而T-betmRNA/GATA-3mRNA比值升高。结论一、对比三个肾阳虚复合模型,羟基脲复合组模型比激素复合组和腺嘌呤复合组模型更稳定,较为理想。二、本实验建立了两种不同证型的AR动物模型,在生存状态和局部过敏症状方面,单纯模型与“外感寒邪,里有水饮”证型接近,肾阳虚复合模型与“外感寒邪,里有阳虚”证型接近。三、两个模型之间血清IFN-γ、IL-4浓度和IFN-ymRNA、IL-4mRNA、T-betmRNA、 GATA-3mRNA表达水平及比值存在显著差异,单纯模型组的变化幅度比肾阳虚复合模型组大。这可能是AR不同中医证型之间的免疫学机制之一,其变化幅度与证型相关。四、从总体作用效果看,小青龙汤和麻黄细辛附子汤对AR的两种模型均有作用,但存在差异。单纯模型中,小青龙汤作用优于麻黄细辛附子汤；肾阳虚复合模型中,麻黄细辛附子汤作用优于小青龙汤。小青龙汤对单纯模型的作用比肾阳虚复合模型更显著；麻黄细辛附子汤对肾阳虚复合模型作用比单纯模型更显著。说明两方治疗不同中医证型的AR具有针对性,方药和证型相应时疗效显著,方药和证型不相应时疗效较差,甚至无影响。五、小青龙汤和麻黄细辛附子汤治疗不同证型的AR是通过调节血清IFN-γ、IL-4浓度和IFN-ymRNA、IL-4mRNA、T-betmRNA、GATA-3mRNA表达水平及比值,进而逆转失衡的Th1/Th2细胞来发挥作用的。