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猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的严重威胁养猪业的病毒性疾病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物传染病,我国也将此病列为一类动物疫病。2005年发布的新版《陆生动物卫生法典》将猪瘟列入OIE规定必须通报疾病名录。在猪瘟的诊断方面,由于猪瘟病毒不同毒株的毒力不同,患病猪的临床症状和死后剖检的病理变化差别很大,根据临床表现和病理变化很难对猪瘟做出确诊。因此,建立准确的实验室诊断方法,对于预防和控制猪瘟有重要意义。本研究对分别应用病毒分离鉴定、荧光抗体法、反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和夹心ELISA 4种方法对23份猪瘟病料组织中的猪瘟病毒进行诊断了比较研究,获得了以下结果:1.采取猪瘟阳性血清提取IgG,标记荧光素,制备了猪瘟荧光抗体。该荧光抗体能够检测感染猪瘟病毒的细胞和猪瘟病料中的病毒抗原。用制备的荧光抗体分别检测感染猪瘟病毒的PK-15细胞和猪瘟病料组织的猪瘟病毒,结果均为阳性,空白对照均为阴性。说明制备的猪瘟荧光抗体可以用于病料中和PK-15细胞中猪瘟病毒的检测,采用直接荧光抗体法可确定病毒在感染细胞中增殖的位置,为猪瘟的实验室诊断提供了实用技术。2.建立了猪瘟病毒的RT-PCR检测方法,该方法的优点是,检出率高、准确性好;检测时间较短,一般可在拿到病料后4～6 h得出结果;并且扩增出的E2基因目的片段可以作为研究猪瘟病毒分子流行病学的基础材料,通过测定不同病料中E2基因的序列,来了解猪瘟病毒的变异并推断其流行趋势,具有重要意义。3.本研究利用4种不同的方法检测相同病料中的猪瘟病毒,结果表明,猪瘟病毒的分离鉴定和RT-PCR检测结果一致;而荧光抗体法检测结果不很理想,存在无法判定结果的样品;夹心ELISA法除了一份病料因保存不当造成假阴性结果外,其余病料的检测结果均与病毒分离鉴定结果一致。所以,在有条件的实验室,可采用RT-PCR进行猪瘟病毒检测,该法操作起来要比病毒分离鉴定方便许多,且不受细胞培养的限制,可应付突然的大量的样品检测;在对新鲜病料中的猪瘟病毒进行检测时,可以选用夹心ELISA法,该法操作更简便,易在基层推广,可作为猪瘟普查时的首选方法。