蜡梅(Chimonanthus praecox L.)冬天开花,香气怡人,广泛应用于切花和园林种植。芳香是蜡梅最为重要的观赏特征,其中乙酸苄酯是蜡梅的主要香气成分之一。本实验室前期对花香物质测定,发现芳香的H93株系乙酸苄酯含量较高,而无香的SW001株系不含乙酸苄酯。本文在实验室前期基础上,以蜡梅芳香的H93和无香的SW001株系为研究材料,比较2个材料3个时期乙酸苄酯含量的差异。筛选转录组库中控制乙酸苄酯合成的差异表达基因CpBEAT5、CpBEAT8,通过实时定量表达分析,结合乙酸苄酯释放量差异,寻找基因表达与花香释放之间的联系。另外将蜡梅CpBEAT5、CpBEAT8转入早花烟草,初步探究该基因的功能。主要研究结果如下:1.芳香株系H93中能检测到乙酸苄酯,但在无香株系SW001任何花期都未发现挥发物中有乙酸苄酯。在H93中不同花期乙酸苄酯的含量变化趋势与底物苯甲醇的含量变化趋势一致,在盛花期两者出现了最大值,与蜡梅花香总挥发物在盛花期达到最高峰现象相同。而在SW001中虽没检测到乙酸苄酯,但在末花期挥发物中存在微量的苯甲醇。2.经蛋白序列比对,CpBEAT5、CpBEAT8在H93和SW001株系中无差异。CpBEAT5含有一个内含子,不同株系中内含子存在差异,而CpBEAT8没有内含子。3.在H93和SW001蜡梅株系中CpBEAT5、CpBEAT8表达存在显著差异。在H93中CpBEAT5、CpBEAT8在盛花期的表达量最高,且呈现出上升后下降的表达趋势,与乙酸苄酯的含量变化趋势一致。但在SW001中,CpBEAT5、CpBEAT8在盛花期表达量最低。CpBEAT5在H93中露瓣期、盛花期、末花期三个时期的表达量都远远高于SW001,CpBEAT8在H93中,盛花期的表达量是SW001的近4倍,而露瓣期和末花期的表达量都低于SW001。4.经启动子序列比对,CpBEAT5启动子在H93和SW001株系中存在17个碱基的差异,H93的启动子比SW001多了一个的决定基因转录始TATA-box。CpBEAT8启动子在两个株系中序列一致。5.在转CpBEAT5、CpBEAT8基因烟草花中,挥发物成分测定显示野生型植株与转基因植株花都能检测到底物苯甲醇,但未检测到乙酸苄酯和苯甲酸苄酯。